二甲双胍是一种用于治疗II型糖尿病的药物，但其中的杂质B（1-(4,6-二氨基-1,3,5-三嗪-2-基)胍）的含量必须控制在0.1%以下。为了准确测定杂质B的含量，Victor David等人提出了一种新的HPLC-二极管阵列检测器（DAD）分离测定方法。
该方法通过应用离子对机制，能够在适当的时间和高分辨率下实现所有分析物的分离。实验中使用了Agilent 1100液相色谱仪，包括脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱和DAD。色谱数据通过Chemstation软件获得。使用的色谱柱是Inertsil 5 ODS-2，长度为250 mm，内径为4.6 mm，恒温在30℃。流动相由乙腈和水组成，体积比为1/4，含有0.01 mol/L的辛酸磺酸钠，pH值调节至3。流速设置为1.2 mL/min。检测可以在218+2 nm和232+2 nm两个波长下实现，参考波长为360+10 nm。
[1] Victor David, Andrei Medvedovici & Florin Albu (2005) Retention Behavior of Metformin and Related Impurities in Ion‐Pairing Liquid Chromatography, Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, 28:1, 81-95
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