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FOXO荧光素酶报告基因:如何检测细胞活性和转录因子的转录活性? 1

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FOXO荧光素酶报告基因(FOXO luciferase reporter plasimd)是一种用于检测FOXO转录活性水平的报告基因。FOXO转录因子家族包括Foxo1, Foxo4, Foxo3a, Foxo6等,它们在调节炎症相关细胞平衡、细胞周期停滞、细胞凋亡和抗氧化应激等免疫相关调节方面发挥重要作用。此外,它们还在物质代谢等方面发挥重要作用。

FOXO报告基因主要用于检测细胞中PI3K/AKT信号通路的活性和FOXO转录因子的转录活性,以及药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMFOXO-Lu是一种改造后的哺乳动物真核表达载体,其中插入了多个FOXO结合位点,可以高灵敏度地检测FOXO的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得FOXO报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱

FOXO-Luc荧光素酶报告基因质粒的运输与保存方法:

质粒在运输过程中需要放在冰袋(wet ice)中,并在收到后放到-20℃保存。

使用FOXO-Luc荧光素酶报告基因质粒时需要注意以下事项:

为了您的健康,请在实验操作时穿实验服并戴一次性手套。

使用说明

使用pGMFOXO-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞,并使用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

主要参考文献

[1] Xiong X, et al. The autophagy-related gene 14 (Atg14) is regulated by forkhead box O transcription factors and circadian rhythms and plays a critical role in hepatic autophagy and lipid metabolism. J Biol Chem. 2012 Nov 9;287(46):39107-14.

[2] Martínez-Moreno M, et al. FoxO-dependent regulation of diacylglycerol kinase α gene expression. Mol Cell Biol. 2012 Oct;32(20):4168-80.

[3] Eckers A, et al. Detection of a functional xenobiotic response element in a widely employed FoxO-responsive reporter construct. Arch BiochemBiophys. 2011 Dec 15;516(2):138-45.

[4] Roy SK, et al. Resveratrol inhibits growth of orthotopic pancreatic tumors through activation of FOXO transcription factors. PLoS One. 2011;6(9):e25166.

[5] Zhang H, et al. Activation of FOXO1 is critical for the anticancer effect of methylseleninic acid in prostate cancer cells. Prostate. 2010 Sep 1;70(12):1265-73.

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