人游离甲状腺素(FT4)ELISA KIT是一种用于测定标本中人游离甲状腺素(FT4)水平的双抗体夹心法试剂盒。
本试剂盒利用双抗体夹心法测定标本中人游离甲状腺素(FT4)水平。首先，在微孔板上包被纯化的人游离甲状腺素(FT4)抗体，形成固相抗体。然后，依次加入游离甲状腺素(FT4)和HRP标记的游离甲状腺素(FT4)抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色反应。显色反应的深浅与样品中的游离甲状腺素(FT4)浓度呈正相关。最后，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），并通过标准曲线计算样品中人游离甲状腺素(FT4)浓度。
1. 加样：在酶标包被板上设空白孔和待测样品孔。在待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样时将样品加于酶标板孔底部，轻轻晃动混匀。
2. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔。依次加入标准品和标准品稀释液，混匀。每个孔的加样量为50μl，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L，150ng/L。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释后备用。
5. 洗涤：揭掉封板膜，加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次。
6. 温育：操作同3。
7. 洗涤：操作同5。
8. 显色：加入显色剂A和显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
9. 加酶：每孔加入酶标试剂，空白孔除外。
10. 终止：每孔加入终止液，终止反应。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
[1] 代丽丽，亚临床甲状腺功能异常患者促甲状腺激素与血清抵抗素、尿酸、同型半胱氨酸相关性研究。《河北医科大学》
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