Recombinant Rat SDF-1β是否能够预防Pal诱导的心肌细胞凋亡? ¹

在处理心肌细胞之前，我们先使用不同剂量的SDF-1β（25 nM、50 nM、100 nM）进行预处理1小时，然后与Pal一起处理15小时。我们使用western-blot和细胞死亡ELISA的方法来检测c-caspase3的变化和DNA链断裂的情况。西方印迹结果显示，25 nM和50 nM的Recombinant Rat SDF-1β有降低c-caspase3的趋势，但没有统计学差异，而100 nM的SDF-1β能够显著降低c-caspase3的表达（图3.2.1.1A）。细胞死亡ELISA结果显示，25 nM的SDF-1β对Pal诱导的DNA链断裂损伤没有影响，50 nM时可以看到保护性效应，并且与Pal组比较具有显著性差异，而100 nM时，保护性效应更加明显（图3.2.1.1B）。在15小时时，单独使用100 nM的SDF-1β处理组与对照组相比，凋亡细胞更少（图3.2.1.1C），这表明SDF-1β不仅可以预防Pal引起的心肌细胞凋亡，而且对正常培养的心肌细胞也具有抗凋亡效应。

Recombinant Rat SDF-1β是否能够对Pal诱导的心肌细胞硝化损伤、ERS和细胞凋亡具有显著的保护作用？这种保护作用是通过激活AMPK和p38 MAPK后促进IL-6生成而实现的。

SDF-1β是否能够显著提高Akt和ERK1/2的磷酸化水平？然而，这两个信号通路的激活是否参与SDF-1β预防Pal诱导心肌细胞凋亡的作用？因为PI3K抑制剂LY294002和ERK1/2抑制剂U0126并不能阻止Recombinant Rat SDF-1β的抗凋亡效应。与以往的研究相比，我们发现心肌细胞经过Recombinant Rat SDF-1β处理6小时后，p38 MAPK的磷酸化水平显著升高，而Pal对p38 MAPK的磷酸化没有影响。应用p38 MAPK抑制剂SB203580（对p38α和β无选择性）或p38β MAPK特异性siRNA能够完全抑制Pal诱导的ERS和细胞凋亡，这表明SDF-1β保护Pal诱导的ERS依赖的心肌细胞凋亡的效应是通过p38β MAPK实现的。

我们的研究阐明了Recombinant Rat SDF-1β对Pal诱导的心肌细胞凋亡具有预防保护作用的发现。主要有以下几项主要发现：

①Pal能够诱导H9c2细胞的硝化损伤、ERS和凋亡；

②Recombinant Rat SDF-1β的心肌保护作用是通过与其细胞表面的另一受体CXCR7结合，继而激活AMPK和p38β MAPK，促进IL-6生成来实现的。

这些发现为我们理解SDF-1β心脏保护作用的机制提供了新的视角，即除了具有促进血管新生的作用，同时还具有抗心肌细胞凋亡的作用。

参考文献

[1]基质细胞衍生因子-1对高脂诱导心肌细胞凋亡的预防作用及机制