Droxinostat，又名NS 41080，是一种选择性抑制HDAC的药物。它主要对HDAC 6和8起作用，IC50分别为2.47μM和1.46μM，对HDAC3的选择性大于8倍，对HDAC1,2,4,5,7,9和10没有抑制作用。那么Droxinostat的生物活性是什么？如何进行实验呢？下面将详细说明。
首先，我们来介绍Droxinostat的体外活性：
1）体外活性
Droxinostat最初被发现对PPC-1细胞对FAS和TRAIL的敏感性增强，通过下调c-Fas相关死亡结构域样白细胞介素-1转换酶样抑制蛋白（c-FLIP）的表达。在悬浮但非贴壁条件下培养的PPC-1细胞中，Droxinostat通过激活caspase 8并随后激活线粒体途径使细胞对失巢凋亡敏感。类似地，Droxinostat还使其他癌细胞系对失巢凋亡或CH-11诱导的细胞凋亡敏感。然而，直到最近，Droxinostat的直接目标仍然是未知的。
结果显示，在组蛋白去乙酰化酶（HDAC）同种型1-10中，Droxinostat选择性抑制HDAC3,6和8，IC50值分别为16.9μM，2.47μM和1.46μM，而不抑制其他HDAC成员（IC50> 20μM）。在MCF-7乳腺癌细胞中，Droxinostat通过降低c-FLIPL和c-FLIPS表达，降低细胞存活率和诱导细胞凋亡使细胞对细胞凋亡敏感。
2）体内活性
在SCID小鼠模型中，Droxinostat处理的PPC-1细胞导致远处肿瘤形成比未处理细胞减少。
现在我们已经了解了Droxinostat的生物活性，接下来介绍如何进行活性实验。一般来说，有以下两种方法：
1）细胞实验
将PPC-1细胞（1×104）接种到含有2.5％FCS的100μL培养基中的96孔平底板中过夜。第二天，添加Droxinostat。然后加入CH-11抗体（100ng / mL），将细胞培养24小时，然后用3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四唑（MTT）染料评估细胞活力。
2）激酶实验
使用CycLex HDACs荧光测定法评估HDAC抑制，使用来自HeLa细胞的粗核提取物（主要是HDAC1和HDAC2）。相对活性表示为（处理样品的荧光强度/对照的荧光强度）×100。
通过以上实验方法，我们可以研究Droxinostat的生物活性和作用机制。
参考文献：
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