如何使用甲苯胺蓝染色液对软骨进行染色? ¹

软骨是由软骨组织和软骨膜组成的。软骨膜是一种致密的结缔组织，具有保护和营养软骨的作用。软骨组织由软骨细胞、纤维和基质构成。基质主要由水和软骨粘蛋白组成。甲苯胺蓝是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类。这种染料含有胺基和醌型苯环两个发色团，能够对组织细胞进行染色。甲苯胺蓝的阳离子具有染色作用，可以与组织细胞的酸性物质结合并染色。甲苯胺蓝不仅含有发色团，还含有助色团，可以帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，尤其是细胞核呈蓝色。软骨染色液(甲苯胺蓝法)具有强碱性，有利于组织细胞的着色。

操作步骤

1. 常规脱钙，包埋、固定。
2. 石蜡切片入二甲苯2次。
3. 系列乙醇各1min自来水洗。
4. 入软骨染色液(甲苯胺蓝法)浸染。根据不同组织，染色时间不完全相同。
5. 自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6. 丙酮分化至软骨细胞呈蓝紫色清楚可见。
7. 逐级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

注意：软骨染色液(甲苯胺蓝法)针对较难着色组织的染色，侵染的时间相对延长。

主要参考资料

[1] 中国骨伤科学辞典

[2] 软骨染色液(甲苯胺蓝法)操作说明