背景及概述[1]
酸性蛋白质是一种富含酸性氨基酸的蛋白质。由于氨基酸的侧链基团具有不同的化学性质,一些带有碱性侧链,而另一些带有酸性侧链。因此,蛋白质分子中的碱性基团和酸性基团的数量不同,使得蛋白质在不同pH值的溶液中具有不同的净电荷。当蛋白质分子带有较多的正电荷时,它被称为碱性蛋白质(等电点偏向碱性);当蛋白质分子带有较多的负电荷时,它被称为酸性蛋白质(等电点偏向酸性)。酸性固绿染色液利用酸性蛋白质与带有正电荷的酸性染料固绿结合进行染色。在细胞中,酸性蛋白质主要存在于细胞质和核仁中,因此染色后,细胞质和核仁大部分呈绿色。需要注意的是,酸性固绿染色液仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成[1]
操作步骤[1]
- 取新鲜鲜血1滴滴于在破片一端,推片,室温晾干。
- 涂片浸入70%乙醇中固定5分钟,室温晾干。
- 涂片浸入酸性分子分化液中,60℃水浴30分钟。
- 水充分水洗,滤纸吸取残留水分。
- 涂片浸入酸性固绿染色液染色5-15分钟,
- 流水冲洗,室温晾干。
- 直接镜检或滴加1滴中性树胶,加盖盖破片进行封片观察。
注意事项[1]
- 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
- 血细胞涂片染色要求新鲜全血或EDTA抗凝血。
- 酸性分化液孵育后,冲洗应彻底,否则会干扰固绿的染色。
- 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复杂。
- pH值对染色有一定影响,在破片应清洁,无酸碱污染,以免影响染色效果。
主要参考资料
[1]酸性固绿染色液操作说明