猫α干扰素ELISA试剂盒的应用及原核表达？ ¹

背景^[1-3]

猫α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒是一种用于测定标本中猫α干扰素(IFN-α)水平的双抗体夹心法。该试剂盒利用纯化的猫α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板，形成固相抗体。然后依次加入α干扰素(IFN-α)试剂盒和HRP标记的α干扰素(IFN-α)抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色。根据颜色的深浅和样品中的α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，可以计算样品中猫α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒的浓度。

ELISA流程

干扰素（IFN）是一类由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子，具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等多种生物活性。天然干扰素分为三种多肽：IFN-α、IFN-β和IFN-γ。IFN-α和IFN-β由白细胞和成纤维细胞产生，稳定性较好，并且结合相同的受体。IFN-γ主要由T淋巴细胞分泌，对酸不稳定，结合的受体与前两者不同，IFN-γ的免疫刺激活性最强。IFN-β和IFN-γ只由单个基因编码，而IFN-α由至少23个不同基因编码。

应用^[4][5]

用于猫α和ω干扰素的原核表达及抗病毒活性测定

干扰素（IFN）是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子，具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调控等多种生物学活性。根据GeneBank上收录的猫α和ω干扰素基因序列，可以检测其信号肽部分并去除，得到编码成熟蛋白的序列。通过改造已知的基因序列，使用大肠杆菌偏好的密码子替换原有的密码子，得到新的编码猫α和ω干扰素的基因序列。将这些基因序列连接至原核表达载体中，经过诱导表达和复性处理后，可以得到较纯的重组猫α和ω干扰素。

参考文献

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[5]仇婧.猫α和ω干扰素的原核表达及抗病毒活性测定[D].南京农业大学,2013.