动物细胞培养是生物学基础实验中的基础,养不好细胞,后续的实验都难以开展。而细胞培养中也时常会有各种状况发生,例如细胞生长缓慢、细胞不贴壁等,那么它们可能的原因都有什么呢?让我们一起了解下吧!
Q
细胞生长缓慢
可能原因:
1.培养液及培养方法有误;更换不同培养液或血清也可能导致生长缓慢。
2.培养液中一些细胞生长必须成分如生长因子耗尽或缺乏。
3.培养物中有少量细菌或真菌污染;
4.接种细胞起始浓度太低;
5.细胞老化;
6.支原体污染。
解决方法
1.检查培养液和培养方法是否正确,比较新培养液与原培养液成分,让细胞逐渐适应新培养液;
2.换入新鲜配置培养液,或补加生长因子;
3.用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物;
4.增加接种细胞起始浓度;
5.换用新的保种细胞;
6.分离培养物,检测支原体,如发现支原体污染,丢弃培养物。
Q
细胞不贴壁生长
可能原因:
1.支原体污染。
2.培养瓶瓶底不干bai净。
3.培养液pH 值过碱(NaHCO3 分解)。
4.消化du液或培养液配制错误、过期储存、储存不当。
5.细胞老化(如传代前细胞已汇合导致失去贴附性)。
6.接种细胞起始浓度太低或太高。
解决方法:
1..缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度.
2.分离培养物,检测支原体.清洁支架和培养箱.如发现支原体污染,丢弃培养物.
3.注意刷洗,或换用一次性塑料培养瓶.
4.使用无菌醋酸溶液调整pH 值或充入无菌CO2(将培养液敞口放入培养箱也可).
5.重新配置消化液或培养液.
6.启用新的保种细胞.
7.调节最佳接种细胞浓度.
Q
培养细胞死亡
可能原因:
1.培养箱内无CO2;
2.培养箱内温度波动太大;
3.细胞冻存或复苏过程中损伤;
4.培养液渗透压不正确;
5.培养液中有毒代谢产物堆积。
解决方法:
1.检测培养箱内CO2;
2.检查培养箱内温度;
3.取新的保存细胞种;
4.检测培养液渗透压;
5.换入新鲜培养液。
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