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高效液相洗脱剂加三氟乙酸后基线走不平??

本人用的是waters的2487高效液相，全手动，检测的是一个多肽物质，所以洗脱剂是含0.1%三氟乙酸的乙腈和含0.1%三氟乙酸的水，问题是用纯的乙腈和水走基线可以走到小数点后面5位或6位数（单位Au），而用0.1%三氟乙酸的乙腈和含0.1%三氟乙酸的水，基线只能走到小数点后3位数。为什么？？？怎么办？？？IMG_1019.JPGQQ图片20160421204647.jpgQQ图片20160421204704.jpg

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共5个回答

喵颜，水性漆工程师 2018-04-21回答

三氟乙酸低波长处有较强的吸收值，造成基线噪音偏高。乙酸甲酸高氯酸三氟乙酸及其相关缓冲盐都存在这样的问题。

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趁微风不噪趁，给排水工程师 2018-04-21回答

无外乎就是水tfa或者液相问题。尽量选用高纯的试剂，最好是进口的tfa

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法拉利，设备工程师 2018-04-21回答

蛋白质或多肽分析喜欢用三氟乙酸是因为：1它可以抑制氨基酸中羧基的解离??2与氨基形成离子配对。这两种作用都使得蛋白质或多肽：1保留时间延后，利于各种蛋白质杂质的分离； 2使峰变窄，提高理论塔半数；3降低拖尾因子。基线噪音会影响定量限和检测限，只要你平时检测浓度下，样品峰或杂质峰与噪音之比大于20倍以上，就可以了。如果非得把基线噪音降低，就只能：1 改变波长 2 把三氟乙酸换成戊烷磺酸钠（同时磷酸调节ph至2.0左右）试一下，

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呆檬，给排水工程师 2018-04-21回答

我觉得是流动相问题，搅拌、超声脱气、过滤不要省。

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忘怀.，给排水工程师 2018-04-21回答

定量限是杂质准确定量的基本要求，扯远了。同意楼上, 不过你先把柱子去掉，接两通。排除柱子影响。再换试剂。??另外厂家给的图上，单位也是一样的吗？

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