引言：
Giemsa染色作为一种常用的生物学染色技术，其成功的关键在于其特殊的成分组合。了解Giemsa染色剂的成分，有助于我们深入了解其在细胞学和组织学研究中的应用。
简介：
吉姆萨染色法以德国科学家古斯塔夫·吉姆萨 (Gustav Giemsa) 的名字命名，是一种用于显微镜区分各种细胞类型和微生物的多功能工具。它最初主要用于识别疟原虫，现已成为细胞学 (研究细胞)、组织学 (研究组织) 和微生物学 (研究微生物) 的基石染色法。吉姆萨等染色技术依赖于染料与特定细胞成分的选择性结合，从而产生对比色，在显微镜下揭示大量信息。这使科学家能够诊断疾病、研究正常细胞过程并根据其详细结构对不同生物体进行分类。
1. 吉姆萨染色剂的化学成分
吉姆萨溶液由伊红和亚甲基蓝(天蓝色)组成。伊红成分使寄生核染红，亚甲基蓝成分使细胞质染蓝。薄膜用甲醇固定。染色剂主要由三种主要成分组成：
（1）亚甲蓝和天青 B
这些是碱性染料，可将核酸（RNA 和 DNA）染成紫蓝色。
（2）伊红 Y
这是一种酸性染料，可将细胞质成分（如蛋白质）染成粉红色至红色。
2. 吉姆萨染色剂的制备
吉姆萨染色剂成分的具体比例可能因制造商和所需的染色效果而异。吉姆萨染色剂的基本成分是相同的；然而，稀释液可以根据其预期目的制备。吉姆萨染色剂成分的具体比例和制备可以参考以下方法：
（1）将 3.8g 吉姆萨粉加入 250ml 甲醇中并溶解。
（2）将溶液加热至约 60℃。
（3）慢慢将 250ml 甘油加入溶液中。
（4）过滤溶液，静置约 1-2 个月后即可使用。
3. 吉姆萨染色配方和变化
（1）针对特定应用的不同配方
吉姆萨染色剂以其多功能性而闻名，根据预期用途有各种配方。对于血片，通常使用稀释的工作溶液，而组织切片可能需要更浓缩的染色剂或分化等额外步骤。这些变化凸显了吉姆萨染色剂针对不同细胞成分并实现预期结果的适应性。
（2）染色方案和技术的变化
染色方案本身也随着时间的推移而发生变化。传统上，吉姆萨染色涉及冗长的固定步骤和磷酸盐缓冲液洗涤。现代方案通常利用甲醇的较短固定时间和简化的冲洗程序，使该过程更快、更高效。
（3）与其他常用染色溶液的比较
与其他常见染色溶液（如瑞氏染色剂）相比，吉姆萨提供了更广泛的分化范围，可以更好地显示细胞细节。然而，瑞氏染色剂提供更快的结果，通常是初始血片检查的首选。最终，吉姆萨与其他染色剂之间的选择取决于分析的具体需求和所需的细节水平。
4. 吉姆萨染色步骤
吉姆萨染色是最广为人知的组织学染色之一，根据细胞质内容物的酸性，将细胞核染成深蓝色，将细胞质染成蓝色至粉红色。
（1）将风干样品在甲醇中固定 10 分钟。
（2）风干直至甲醇全部蒸发。
（3）在含有 5% 吉姆萨染料（用自来水稀释）的染色缸中染色 20 分钟。
（4）将样品放入装满自来水的大烧杯中清洗，直到去除多余的吉姆萨染色剂。
（5）风干并在显微镜下检查。
5. 吉姆萨染色的应用
（1）吉姆萨染色对 DNA 的磷酸基团具有特异性，并附着在腺嘌呤-胸腺嘧啶键合量高的 DNA 区域。吉姆萨染色用于吉姆萨显带（通常称为 G 显带）以染色染色体，并经常用于创建核型图。它可以识别染色体畸变，例如易位和重排。
（2）它染色滋养体阴道毛滴虫，该滋养体在湿制剂中呈现绿色分泌物和运动细胞。
（3）吉姆萨染色也是一种鉴别染色，例如当它与瑞氏染色剂结合形成瑞氏-吉姆萨染色剂时。它可用于研究致病菌对人体细胞的粘附。它分别将人类和细菌细胞鉴别染成紫色和粉红色。它可用于对引起疟疾的疟原虫种和一些其他螺旋体和原生动物血液寄生虫进行组织病理学诊断。它还用于染色宿主组织中的沃尔巴克氏体细胞。含有曲霉菌菌丝的痰液的吉姆萨染色如下图：
（4）吉姆萨染色剂是用于外周血涂片和骨髓标本的经典血膜染色剂。红细胞染成粉红色，血小板呈淡粉色，淋巴细胞胞浆染成天蓝色，单核细胞胞浆染成淡蓝色，白细胞核染色质染成洋红色。它还用于可视化鼠疫耶尔森氏菌中的经典“安全别针”形状。
（5）“猫头鹰眼”病毒内含物，与巨细胞病毒感染有关。吉姆萨染色剂还用于可视化染色体。这对于检测巨细胞病毒感染特别重要，其中经典的发现是“猫头鹰眼”病毒内含物。
（6）吉姆萨染色真菌组织胞浆菌、衣原体细菌，可用于识别肥大细胞。
6. 结论
Giemsa染色剂的主要成分包括甲醇和甘油，以及一系列特殊的染色剂。这些成分的精确配比和染色过程的严格控制，是确保Giemsa染色技术成功的关键。通过这种染色方法，我们能够在细胞和组织水平上获得清晰的染色效果，从而有助于更好地观察和分析生物体内的微观结构。
参考：
[1]https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/giemsa-stain
[2]https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/B978012818731900152X
[3]https://en.wikipedia.org/wiki/Giemsa_stain
[4]https://www.creative-bioarray.com/support/giemsa-staining-protocol.htm
[5]https://www.macsenlab.com/blog/giemsa-stain-overview/
[6]https://www.slideshare.net/slideshow/romanowskystains180521083448-1pptx/262758250
[7]https://microbeonline.com/giemsa-stain-principle-procedure-and-results/
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