3-硝基邻苯二甲酰肼是一种常用于制备鲁米诺类试剂的化合物。它具有较高的发光量子产率和良好的水溶性，可以与多种氧化剂发生化学反应，因此成为应用最广泛的化学发光试剂之一。鲁米诺类试剂在碱性条件下通过辣根过氧化物酶催化，被双氧水氧化生成激发态中间体，当回到基态时会发出光子。因此，鲁米诺类试剂具有广阔的市场需求和重要的应用价值。
制备鲁米诺类试剂的方法如下：
1. 在干燥的1000ml三口烧瓶中加入100g 3-硝基邻苯二甲酸二甲酯、乙醇140g和水合肼(50％)83.6g，搅拌加热至回流，维持回流反应3小时，然后搅拌降温并冷却到室温后抽滤。结晶再加水溶解、过滤，溶液再加浓盐酸酸化至PH1.5-2，过滤，水洗、干燥得到60g淡黄色结晶粉末的3-硝基邻苯二甲酰肼，产率为69％，纯度为98.2％，熔点＞300℃。
鲁米诺类试剂的应用方法如下：
1. 向5000ml三口烧瓶中依次加入260g 3-硝基邻苯二甲酸、78g 尿素和2000ml 二甲基甲酰胺，加热至回流(110℃)，回流5小时，冷却至室温(25℃)，得到含3-硝基邻苯二甲酰亚胺的混合产物A。
2. 向三口烧瓶中加入160ml 80wt％的水合肼水溶液，加热至回流(110℃)，回流3小时，冷却至室温，得到含3-硝基邻苯二甲酰肼的混合产物B。
3. 向三口烧瓶中加入5g 10wt％(以钯含量计)的钯碳，搅拌均匀后加热至35℃，搅拌下缓慢滴加260g 85wt％甲酸水溶液，滴加时间为2小时。滴加结束后，继续反应3小时，用35wt％浓盐酸调节pH至3-4，继续加热至100℃，趁热过滤，将滤液冷却至10℃，大量沉淀析出。沉淀析出完全后过滤，将滤液进行有机溶剂回收，滤饼用300ml去离子水洗涤，干燥，得到182g鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酰肼)。收率为83％，HPLC纯度为99.31％，颜色为类白色。
[1] [中国发明]CN200610039015.4一种合成3-硝基或3-氨基邻苯二甲酰肼的方法
[2] CN201710051577.9一种利用一锅法合成鲁米诺或异鲁米诺的方法
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