尼氏染色液是一种使用优质焦油紫（Cresyl violet）作为原料的染色液。它可以染色尼氏小体和细胞核，呈现蓝紫色，清晰地显示脑或脊髓等基本神经结构。尼氏染色液具有染色鲜明、稳定、操作简便、适用范围广的特点，可用于石蜡或冰冻切片以及细胞样品的尼氏小体和神经元的染色。尼氏小体是胞浆内的一种嗜碱性物质，能被碱性染料染成蓝紫色。
尼氏小体广泛分布于各种神经元，但其形状、大小和数量有所差异。尼氏小体存在于树突中，但不在轴突和包体的轴丘中。尼氏染色后，尼氏小体呈斑驳状，核周围的尼氏小体较大，靠近边缘的尼氏小体较小而细长。在正常生理情况下，尼氏小体较大且数量较多，反应神经细胞合成蛋白质的功能较强。而在神经元受损时，尼氏小体的数量可能减少甚至消失。尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏小体，但其形状、数量和分布位置常常不同。尼氏小体也存在于树突中，但不在轴突和包体的轴丘中。尼氏小体是神经元内合成蛋白质的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏小体会明显减少。通过尼氏染色，可以很好地显示尼氏小体的变化。
黑质（substantia nigra）和腹侧被盖区（ventral tegmental area）是中脑中两个重要的多巴胺能神经核团。以往的研究表明，多巴胺能神经细胞可能在应激反应中发挥作用，但其详细的作用机制尚不清楚。因此，本研究旨在系统观察不同时程应激对大鼠中脑黑质和腹侧被盖区多巴胺能神经细胞的病理性改变，并探明多巴胺能神经细胞特异性标记物酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase）及内质网应激相关蛋白的表达变化，为应激性损伤的机制研究提供病理形态学依据。
方法：本实验使用60只体重为200±20g的SD（Sprague-Dawley）雄性大鼠，随机分为1天、3天、7天、14天和21天组以及各相应时间点的对照组，每组6只。实验组采用束缚加冰水游泳应激模型（RS+IS应激模型），即给予大鼠每天6小时（8:00-14:00）仰卧位固定的束缚处理，同时禁食水，束缚完毕后立即进行5分钟的冰水游泳。在实验组处理期间，各对照组禁食水并自由活动于笼中，其余时间所有大鼠自由进食水。各实验组及相应对照组大鼠于实验结束的第二天处死，取脑组织进行固定、脱水、透明、包埋和连续性切片，以进行各种组织病理学染色。与对照组相比，应激1天组没有明显变化，3天组部分神经细胞出现水肿，尼氏小体结构不清。
[1] The apoptosis induced by silica nanoparticle through endoplasmic reticulum stress response in human pulmonary alveolar epithelial cells[J]. Tianshu Wu, Shihan Zhang, Xue Liang, Keyu He, Tingting Wei, Yan Wang, Lingyue Zou, Ting Zhang, Yuying Xue, Meng Tang. Toxicology in Vitro. 2019.
[2] The hidden side of Parkinson's disease: studying pain, anxiety and depression in animal models[J]. Fanny Faivre, Anil Joshi, Erwan Bezard, Michel Barrot. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 2018.
[3] The antimicrobial protection hypothesis of Alzheimer's disease[J]. Robert D. Moir, Richard Lathe, Rudolph E. Tanzi. Alzheimer's & Dementia: The Journal of the Alzhei. 2018.
[4] Endoplasmic reticulum stress in pulmonary fibrosis[J]. Ankita Burman, Harikrishna Tanjore, Timothy S. Blackwell. Matrix Biology. 2018.
[5] 牛世霸. 应激对大鼠中脑多巴胺能神经细胞的影响及机制探讨[D]. 河北医科大学, 2019.
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