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有一个因子,想把它的受体找出来?

现在有一个因子,想把它的受体找出来,已知它的一些功能,也可以拿到很多的因子。做了好长好长时间了,开始想用GST-pull-down,后来蛋白表达后没有纯化出来,现在用免疫共沉淀,结果也不是很理想。下一步打算作同位素。

说很难,大家有做过的吗?

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共4个回答
先确定你用的细胞存在这个受体,可以考虑用荧光标记法进行结合后观察。
是不知道此受体,还是已经知道了此受体,想鉴定?不如把该细胞因子说出来,做PULL DOWN的系统说出来,好让大家知道你是实验技术有问题还是理论基础有困难。
可以试用以下方法:1 免疫电镜:可用通过生物素,胶体金标记。2 免疫亲合层:通过sepharose 4B隅联,洗脱,再收集跑电泳。
你有没有对于这个因子本身进行一些分析,如有没有同源性很高的基因存在,可能是属于哪个家族的?这个基因编码的蛋白质二级结构有什么特征?有没有可能试一试三级结构预测?我想理论上是可以找一些膜蛋白质的数据(结构),模拟一下protein docking,这样可能会给你提供一些线索!也增加了你文章的水平,现在的好文章大多会用一些生物信息学的方法
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