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多聚右旋赖氨酸在石墨烯三维微电极阵列芯片上的应用? 1

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多聚右旋赖氨酸(PDL)是一种人工合成的多聚肽,具有较低的免疫原性,但可以增加半抗原的免疫性。它含有更多的自由氨基,可以提高载体蛋白质与半抗原的偶联率。因此,近年来在人工免疫抗原的制备中越来越广泛应用。多聚右旋赖氨酸是多聚左旋赖氨酸的异构体。

在石墨烯三维微电极阵列芯片上的应用

多聚右旋赖氨酸可以用于在石墨烯三维微电极阵列芯片上进行细胞培养和检测。

(1) 石墨烯三维微电极阵列的表面处理:在接种细胞之前,将石墨烯三维微电极浸泡在75%乙醇溶液中一小时,然后晾干。接着,在石墨烯三维微电极阵列表面滴加浓度为2μg/cm2的多聚右旋赖氨酸溶液,常温过夜,然后用超纯水冲洗三次,最后风干。

(2) 石墨烯三维微电极阵列表面接种细胞:使用消化液(0.25%胰蛋白酶,0.02%EDTA溶液)将常规培养的SH-SY5Y细胞消化、离心、吹打,然后以1.0×107cells/mm3的密度接种在石墨烯三维微电极阵列芯片上。

(3) SH-SY5Y细胞诱导分化:为了将SH-SY5Y细胞分化为神经细胞,培养液中添加含有10nM全反式维甲酸、10%胎牛血清、0.11g/L丙酮酸钠和300mg/L谷氨酰胺的MEM/F12培养基。由于维甲酸光不稳定,培养过程中需避光,并每天更换培养液。

(4) 细胞检测:培养5天后,将石墨烯三维微电极阵列芯片固定在多通道电信号检测系统的夹具中,然后将夹具放置在倒置显微镜的样品台上。在进行成像观察的同时,记录细胞产生的自发动作电位。

主要参考资料

[1] CN201510885266.3一种石墨烯三维微电极阵列芯片、方法及其应用

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