生物医学工程

做过脂质体转染和流式的大佬帮帮忙？

前辈同仁们，最近刚开始接触细胞的脂质体转染和流式，用lipo2000做了hela细胞的转染，空载质粒是pcDNA3.1加GFP标签的，48小时后做流式发现细胞早凋率上升了二三十倍，重复实验和单因素实验都做了，就是想不通为什么转染这个空载质粒会影响细胞凋亡，各位前辈有用过这种质粒的吗？有什么好的建议吗？

展开

0评论 +关注

共4个回答

是妳，销售 2021-03-26回答

转染试剂就是会有点儿毒性，质粒里也会带些内毒素。
如果比较介意这个情况，可以使用无内毒素的质粒提取试剂盒和低毒性的转染试剂（比如TRANSIT-LT1）

7 评论 0 举报

小花妹妹。小，工艺技术员 2021-03-26回答

你好，我已经做过单因素实验，转染试剂和质粒对细胞的毒性很小，并且我用的就是去内毒素抽提的质粒，空载质粒的转染导致20%的早凋应该是不正常的吧
...
转染试剂都会有一些毒性，只是有时候比较低看不出来而已。
可以检测一下支原体，有时候细胞虽然有支原体污染，但是平时养得好好的看形态和增殖速率也看不出问题。但是一旦有一些压力存在（比如转染），细胞自身的压力达到一定阈值，就会有凋亡。

展开

13 评论 0 举报

太牵强不勉强，设备工程师 2021-03-26回答

转染试剂就是会有点儿毒性，质粒里也会带些内毒素。
如果比较介意这个情况，可以使用无内毒素的质粒提取试剂盒和低毒性的转染试剂（比如TRANSIT-LT1）
你好，我已经做过单因素实验，转染试剂和质粒对细胞的毒性很小，并且我用的就是去内毒素抽提的质粒，空载质粒的转染导致20%的早凋应该是不正常的吧

展开

16 评论 0 举报

Amygrl，设备工程师 2021-03-26回答

转染试剂都会有一些毒性，只是有时候比较低看不出来而已。
可以检测一下支原体，有时候细胞虽然有支原体污染，但是平时养得好好的看形态和增殖速率也看不出问题。但是一旦有一些压力存在（比如转染），细胞自身的 ...
好的，我去做一下pcr 检测看看，先谢过

展开

1 评论 0 举报