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waters C18柱子压力上升降不下来？

蛋白样品400ul+400ulHFIP+200ul甲酸溶解后离心上样，bufferA为100%水+0.1%TFA，bufferB为100%乙腈+0.1TFA，上样三四次后，柱子压力逐步升高，我用的是waters的C18柱子，用水—异丙醇-甲醇-水，梯度冲洗，bufferA为100%水+0.1%TFA，bufferB为100%乙腈+0.1TFA，梯度冲洗，压力都没有降下来，怎么办能使压力不上升呢？不接柱子压力很小，应该就是柱子的原因

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共6个回答

冰言儿〆，设备维修 2018-04-20回答

不同意一楼的观点反冲绝对不是首选的方法建议选择更强的溶剂如dmso或者dmf来冲洗另外之前有位坛友也遇到过蛋白堵柱子的问题他是用蛋白酶来冲洗柱子压力降下来了供lz参考蛋白酶是冲洗蛋白样品堵塞的好办法，

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故俗，化工研发 2018-04-20回答

反冲，正着冲越冲越不好处理

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为她，不为我，化工研发 2018-04-20回答

不同意一楼的观点反冲绝对不是首选的方法建议选择更强的溶剂如dmso或者dmf来冲洗另外之前有位坛友也遇到过蛋白堵柱子的问题他是用蛋白酶来冲洗柱子压力降下来了供lz参考

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树敌，化工研发 2018-04-20回答

蛋白酶是冲洗蛋白样品堵塞的好办法... 用什么蛋白酶啊，我的融合蛋白是mbp。担心是融合蛋白没有洗下来

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四驹，给排水工程师 2018-04-20回答

这样要加强样品的前处理，不然柱子费的快，银子花花的

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余良清叶菲墨，设备维修 2018-04-20回答

用什么蛋白酶啊，我的融合蛋白是mbp。担心是融合蛋白没有洗下来... 你去买，就买你这个mbp的溶解酶，只要知道什么堵了，剩下的事情很好做的，

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