ems 诱变 常用浓度0.05-0.5mol/l，作用时间5-60min。小心点，那东西剧毒且致癌。人工化学诱变技术:化学诱变技术是指利用一些化学物质提高生物的自然突变率，这些化学物质就叫做“化学诱变剂”。其特点有：可操作性强，简单易行；特异性较强，能诱变定位到dna上的某些碱基；后代较易稳定遗传，一般到f3代就可稳定；应用于遗传标记，是细胞融合技术的基础。诱变剂主要包括5类，他们的特点、机理和应用如下：1、烷化剂：能使一些碱基烷基化，比如使鸟苷酸甲基化，影响mrna的转录，从而使蛋白质的表达紊乱，使得蛋白质重组，而改变了性状。临床上应用此类物质作为抗癌药物，具有强烈杀伤癌细胞的作用，所以在应用在于植物上时，也要注意他的强烈杀伤性。主要有：甲基磺酸乙酯（ems），是最常用的诱变剂，我们曾用作真菌的遗传标记，诱变率很高。常用浓度0.05-0.5mol/l，作用时间5-60min。该物质具有强烈致癌性和挥发性，可用5%硫代硫酸钠作为终止剂和解毒剂。sigma公司价格：80元/25ml。硫酸二乙酯（dms），也很常用，但由于毒性太强，目前很少使用，作用机理和使用方法和ems基本相同。属于剧毒品，受公安局管治。乙烯亚胺，生产的较少，很难买到。只要用于大量诱变育种用，使用浓度：0.0001-0.1%，高度致癌性！使用时需要使用缓冲液配置。盐酸氮芥，用于抗癌药物，可以从药店买到，但有些地方必须有主任医师的处方。一般是针剂，稍加稀释即可使用，作用时间5-10min，可用甘氨酸作为终止剂和解毒剂。环磷酰胺、亚硝基胍等物质也可作为诱变剂使用，但较少使用。2、碱基类似物：分子结构类似碱基，导致dna复制时产生错配，mrna转录紊乱，功能蛋白重组，表型改变。该类物质毒性相对较小，但负诱变率很高，往往不易得到好的突变体。主要有：6-溴尿嘧啶、6-budr、马来酰肼、2-氨基嘌呤等，同样属于抗癌药物，可到药店买到，稍加稀释即可使用。3、嵌入剂：是分子生物学比较常用的一类，诱导率较高。原理是这类分子的大小正好可以嵌入碱基分子中，导致错配。最常用的：溴化乙锭（eb），高致癌性！价格较贵，但诱变率很高，是实验室常用试剂，可以到生化实际商店买到，1500元/100mg.4、 无机化合物：比较容易得到，效果一般，危险性较小。常用：氯化锂，白色粉状，使用时配成0.1-0.5%的溶液，作用30min-2d。可到化工商店买到：120元/500克。亚硝酸：没有现成商品，由于该物质易分解，所以现配现用。常用亚硝酸钠和盐酸制取，将亚硝酸钠配成0.01-0.1mol/l的浓度，使用时加入等浓度等体积的盐酸即可。过氧化氢：又名双氧水，效果不好，所以很少用到。5 其他：盐酸羟胺，一种还原剂，作用于c上，是g-c变为a-t。也较常用，可以买到。使用浓度：0.1-0.5%，作用60min-2h。较便宜。生物碱类：如长春碱、秋水仙碱、喜树碱等。以上的诱变剂同时又是致癌物！使用时必须小心。通常用来浸种，最好的方法是将诱变剂加到组织培养的培养基中，诱变率最高。对人体危害甚大，有一定的致癌作用。操作时，要严密防护，切勿让药剂沾到皮肤。用过的工具，也要严格收藏隔离，以防失误二、常用化学诱变剂的种类及作用机制--------------------------------------------------------------------------------（一）烷化剂是栽培作物诱发突变的最重要的一类诱变剂。药剂带有一个或多个活泼的烷基。通过烷基置换，取代其它分子的氢原子称为"烷化作用"所以这类物质称烷化剂。烷化剂分为以下几类：1. 烷基磺酸盐和烷基硫酸盐代表药剂：甲基磺酸乙酯（ems）、硫酸二乙酯（des）2. 亚硝基烷基化合物代表药剂：亚硝基乙基脲（neh）、n-亚硝基-n-乙基脲烷（neu）3. 次乙胺和环氧乙烷类代表药剂：乙烯亚胺（ei）4. 芥子气类氮芥类、硫芥类烷化剂的作用机制--烷化作用 作用重点是核酸，导致dna断裂、缺失或修补。（二）核酸碱基类似物这类化合物具有与dna碱基类似的结构。代表药剂：5-溴尿嘧啶（bu）、5-溴去氧尿核苷（budr） 为胸腺嘧啶（t）的类似物2-氨基嘌呤（ap） 为腺嘌呤（a）的类似物马来酰肼（mh） 为尿嘧啶（u）的异构体作用机制：作为dna的成份而渗入到dna分子中去，使dna复制时发生配对错误，从而引起有机体变异。（三）其它诱变剂亚硝酸 能使嘌呤或嘧啶脱氨，改变核酸结构和性质，造成dna复制紊乱。hno2还能造成dna双链间的交联而引起遗传效应。叠氮化钠(nan3) 是一种呼吸抑制剂，能引起基因突变，可获得较高的突变频率，而且无残毒。
