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尿嘧啶 DNA 糖苷酶的作用原理是什么? 1

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尿嘧啶 DNA 糖苷酶(UDG)是一种能够切断 DNA 中的尿嘧啶碱基的酶。它能够移除 DNA 中的尿嘧啶,生成无碱基位点。无碱基位点能够被其他核酸酶识别并修复。UDG 在 DNA 修复过程中起着重要的作用,并且与机体免疫功能相关。此外,UDG 还可以用于防止 PCR 产物污染。鉴于 UDG 在生命科学中的重要性,对其活性进行检测具有极其重要的意义。

UDG酶的生物特性

自从首次在大肠杆菌中发现 UDG 活性以来,已经在各类生物中广泛发现了该酶的存在。这些酶的物化和酶学特性相似,包括分子结构、底物特异性和酶活性不依赖金属辅因子等。

UDG 是一种单体蛋白,具有较稳定的物化性质和较小的分子量。不同类型的细胞中,UDG 的分子量和催化活性存在差异。核和线粒体中的 UDG 分子量和催化活性较高,而原核细胞中的 UDG 分子量和催化活性较低。这表明核和线粒体中的 UDG 可能与原核细胞中的 UDG 相关。

UDG酶的底物专一性

UDG 对底物有非常严格的专一性要求。它只能识别尿嘧啶碱基,且尿嘧啶必须是脱氧核苷的组成部分,并且存在于多聚物中。

研究发现,糖-磷酸骨架是底物结构中 UDG 识别的关键。虽然 UDG 对多聚核苷酸有相对非特异性,能够与单链、双链 DNA 和 RNA 结合,但它只能作用于多聚核苷酸中的 2'-脱氧核糖上的尿嘧啶残基。

参考文献

[1] 基于分子信标的尿嘧啶 DNA 糖苷酶活性测定

[2] Nilsen H, Otterlei M, Haug T, et al. Nuclear and mitochondrial uracil-DNA glycosylases are generated by alternative splicing and transcription from different positions in the UNG gene[J]. Nucleic Acids Res, 1997, 25(4): 750-755.

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