增强型DAB显色试剂盒是一种用于免疫组化显色、原位杂交显色或膜显色的试剂盒。该试剂盒采用辣根过氧化物酶(HRP)作为催化剂,利用DAB底物产生棕色沉淀。该试剂盒具有灵敏度高、背景低、重复性好、储存稳定、使用方便等特点,适用于蛋白印迹、免疫组织化学和免疫细胞化学等领域的染色和显色反应。
1. 对于组织切片或蛋白质印记膜,先用适当洗涤液洗涤,然后与HRP标记的抗体或其他形式的探针孵育。
2. 将溶液A、溶液B、溶液C混合均匀,制备DAB工作液。
3. 将DAB工作液加入样品中,确保样品完全被覆盖。
4. 在室温避光条件下孵育样品,观察显色过程并在适当的显色强度下终止反应。
5. 对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后可进行其他染料复染。对于膜样品,显色反应终止后可晾干保存。
该研究采用免疫组化二步法检测DAB2IP在胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织中的表达,并观察其与胰腺癌患者临床和病理参数之间的关系。具体操作包括石蜡切片组织处理、抗原修复、抗体孵育、显色等步骤。
[1] Low expression of DAB2IP contributes to malignant development and poor prognosis in hepatocellular carcinoma[J]. Xiaojing Zhang, Ning Li, Xianzheng Li, Wei Zhao, Yudan Qiao, Li Liang, Yanqing Ding. Journal of Gastroenterology and Hepatology. 2012(6)
[2] Epothilone B Confers Radiation Dose Enhancement in DAB2IP Gene Knock-Down Radioresistant Prostate Cancer Cells[J]. Zhaolu Kong, Pavithra Raghavan, Daxing Xie, Thomas Boike, Sandeep Burma, David Chen, Arup Chakraborty, Jer-Tsong Hsieh, Debabrata Saha. International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 2010(4)
[3] Inactivation of Ras GTPase-activating proteins promotes unrestrained activity of wild-type Ras in human liver cancer[J]. Diego F. Calvisi, Sara Ladu, Elizabeth A. Conner, Daekwan Seo, Jer-Tsong Hsieh, Valentina M. Factor, Snorri S. Thorgeirsson. Journal of Hepatology. 2010(2)
[4] Decreased Expression of the RAS-GTPase Activating Protein RASAL1 Is Associated With Colorectal Tumor Progression[J]. Miki Ohta, Motoko Seto, Hideaki Ijichi, Koji Miyabayashi, Yotaro Kudo, Dai Mohri, Yoshinari Asaoka, Motohisa Tada, Yasuo Tanaka, Tsuneo Ikenoue, Fumihiko Kanai, Takao Kawabe, Masao Omata. Gastroenterology. 2009(1)
[5] 段伊帆. DAB2IP在胰腺癌中的异常表达及其意义的研究[D]. 南方医科大学, 2013.