小鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒是一种用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中内皮抑素(ES)含量的试剂盒。它采用双抗体夹心ELISA法进行测定。在实验中,将抗小鼠内皮抑素(ES)抗体包被于酶标板上,样品或标准品中的内皮抑素(ES)与包被抗体结合,洗去游离的成分。然后加入生物素化的抗小鼠ES抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,形成免疫复合物。最后加入显色底物(TMB),通过测量OD值来计算样品中内皮抑素(ES)的浓度。
以下是操作步骤:
1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL,37℃孵育90分钟。
2. 加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟。
3. 洗涤3次。
4. 加入100μL酶结合物工作液,37℃孵育30分钟。
5. 洗涤5次。
6. 加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右。
7. 加入50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD值。
8. 根据测得的OD值计算结果。
[1] 彭星辰;李杭;谭诗生;杨飞月。重组内皮抑素联合吉西他滨对小鼠肺癌移植瘤生长的抑制作用。山东医药。