CD22抗体是一种可以特异性结合B淋巴细胞粘附分子CD22的单克隆抗体,主要用于检测CD22的免疫组化、ELISA等实验。CD22在B细胞信号传导中起重要作用,可以与CD45RO、CD75结合,介导B-B、B-T细胞相互作用。作为一个B细胞限制抗原,CD22针对治疗引起自身免疫性疾病和恶性血液疾病的失调B细胞。
CD22是主要在成熟B淋巴细胞表达的I型跨膜蛋白,起到细胞调节抗原受体信号应答的重要作用。CD22的晶体结构显示其特异性结合模式是由预先形成的β发夹支配的α2-6唾液酸配体。
针对CD22的靶向治疗研究主要集中在对抗CD22单克隆抗体及其衍生药物的开发上,其中Epratuzumab是一种广泛用于临床试验的抗CD22单克隆抗体。HIB22是中国医学科学院血液学研究所免疫室生产的鼠抗人CD22单克隆抗体,与Epratuzumab单抗识别位点不同。不同的单克隆抗体可以产生一系列临床疗效,因为CD22可以通过配体依赖性与非依赖性机制调节B细胞作用。
研究人员使用流式细胞术、MTT检测、RT-PCR、共聚焦显微镜等方法对HIB22单抗进行了体外生物学功能研究,包括对NHL细胞系增殖和凋亡的影响,对正常人PBMC集落生长和CD25表达的影响,以及HIB22与CD22抗原结合后的内化观察。
此外,研究人员还利用小鼠杂交瘤细胞制备了抗CD22单链抗体。通过RT-PCR方法从HIB22杂交瘤中提取抗体轻、重链可变区基因,使用Overlap-PCR构建HIB22-scFv融合基因并定向克隆入原核表达载体pET22b(+),最终得到重组质粒pET22b-HIB22-scFv。经过表达和纯化后,研究人员通过流式细胞术检测了HIB22-scFv与CD22阳性的Raji细胞系细胞膜CD22分子的结合活性和特异性。
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