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如何选择合适的内参抗体用于免疫学实验? 1

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ANTI-BETA-ACTIN抗体是一种特异性结合BETA-ACTIN的免疫抗体,可用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。β-actin是一种由375个氨基酸组成的蛋白,分子量约为42-43kDa。作为内参,β-actin在大多数组织和细胞中广泛分布,表达量丰富,占所有细胞总蛋白的50%。然而,在某些情况下,如脂肪组织或细胞内,β-actin的表达量较低。

选择合适的内参抗体需要考虑目的蛋白的大小。推荐选择与目的蛋白分子量相差5KD以上的内参。由于β-actin的分子量约为42kD,因此该内参抗体不适合用于检测38kD-48kD大小目标蛋白的WB实验。此外,虽然β-actin是最常用的内参抗体之一,但在某些条件下,样品间的β-actin含量也会发生变化。特别需要注意的是,在脂肪组织中,β-actin的表达量非常低,不适合作为内参。

应用于大鼠GAPDH、β-actin mRNA降解与死亡时间推断的相关性研究

该研究利用一步法荧光标记逆转录-聚合酶联反应技术,检测了大鼠死后不同时间间隔脑、肝、脾、肾中GAPDH和β-actin mRNA的降解情况,旨在为死后时间的推断提供新的指标。

通过观察大鼠死后不同时间脑、肝、脾、肾中GAPDH和β-actin mRNA的降解规律,确定了各组织中GAPDH和β-actin mRNA的检测时限,并探讨了它们在死后时间推断中的应用价值。实验结果显示,大鼠死后7天脑组织、48小时肝组织、32小时脾组织、40小时肾组织内均可检测到GAPDH mRNA,8天脑组织、72小时肝组织、40小时脾组织、48小时肾组织内均可检测到β-actin mRNA,且它们的量均呈规律性下降趋势。

参考文献

[1] Is there recent progress in the estimation of the postmortem interval by means of thanatochemistry?[J]. Burkhard Madea. Forensic Science International. 2005(2)

[2] Artificial Neural Network and Tissue Genotyping of Hepatocellular Carcinoma in Liver-Transplant Recipients: Prediction of Recurrence[J]. Hector Rodriguez-Luna, Hugo E. Vargas, Thomas Byrne, Jorge Rakela. Transplantation. 2005(12)

[3] Artificial neural networks in urolithiasis[J]. Prabhakar Rajan, David A. Tolley. Current Opinion in Urology. 2005(2)

[4] Estimation of the time since death in the early post-mortem period[J]. Forensic Science International. 2004(2)

[5] 朱方成. 大鼠GAPDH、β-actin mRNA降解与死亡时间推断的相关性研究[D]. 华中科技大学, 2006.

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