标准绵羊血清(碳吸附过滤)是经过血浆凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。它在细胞培养中起到提供营养物质、激素和生长因子、结合蛋白、促接触和伸展因子以及保护细胞的作用。
标准绵羊血清(碳吸附过滤)经过无菌采集、批量混合,并经过3次0.1um过滤分装,以去除有害物质。它适用于单抗研制、原代和传代细胞培养以及规模化培养的疫苗生产。
碳吸附过滤根据吸附过程中活性炭分子和污染物分子之间作用力的不同,可分为物理吸附和化学吸附。物理吸附主要与活性炭的物理性质有关,而化学吸附则与活性炭和污染物之间的化学键有关。
碳吸附型血清是一种低水平类固醇类的血清产品,通过碳吸附可以降低血清中许多激素和生长因子的浓度。它适用于那些需要这些分子的细胞培养,但可能会降低细胞生长性能。
通过高通量测序的方法,筛选出了一种可以促进绵羊肌肉细胞分化和成肌生成的LncRNA分子(命名为Lnc-SEMT)。研究发现,Lnc-SEMT对骨髂肌的发育具有重要调控作用。这项研究对于揭示动物肌细胞增殖和分化的分子机制,以及肉羊分子辅助育种和开发促生长制剂具有重要意义。
1. 通过对胚胎期90口和120日龄绵羊背最长肌样品进行高通量测序,共计得到1114个lncRNA,其中466个lncRNA差异表达,其中157个lncRNA上调,309个lncRNA下调。
2. 通过对测序得到的1114个lncRNA进行芯片验证,发现有867个预测的lncRNA存在,其中有119个lncRNA的表达上调。对这119个lncRNA进行定量筛选后,得到了一个在骨骼肌组织中特异性高表达的上调LncRNA(命名为Lnc-SEMT)。
3. 通过检测绵羊不同生长时期的Lnc-SEMT表达水平,发现在胚胎期120日龄时,其表达量最高,出生后逐渐降低,成年后表达水平变化不大。
4. 通过检测绵羊成肌细胞生长分化过程中的lncRNA表达量变化,发现在成肌细胞分化0-5天内,随着成肌细胞的生长分化,MYOG和MYOD基因表达水平也随之升高。
5. 构建了Lnc-SEMT的高表达和干扰载体,分别转染到绵羊成肌细胞。通过DAPI和MyHC试验分析,结果表明随着成肌细胞分化过程中Lnc-SEMT的过表达和干扰,MYOG、MYOD等基因的表达也随之变化。
[1] Systematic Characterization of Long Non-Coding RNAs Reveals the Contrasting Coordination of Cis-and Trans-Molecular Regulation in Human Fetal and Adult Heart[J]. Chunjiang He, Hanyang Hu, Kitchener D. Wilson, Haodi Wu, Jing Feng, Siyu Xia, Jared Churko, Kun Qu, Howard Y. Chang, Joseph C. Wu. Circulation: Cardiovascular Genetics. 2016.
[2] A Micropeptide Encoded by a Putative Long Noncoding RNA Regulates Muscle Performance[J]. Douglas M. Anderson, Kelly M. Anderson, Chi-Lun Chang, Catherine A. Makarewich, Benjamin R. Nelson, John R. McAnally, Prasad Kasaragod, John M. Shelton, Jen Liou, Rhonda Bassel-Duby, Eric N. Olson. Cell. 2015(4).
[3] From Discovery to Function: The Expanding Roles of Long NonCoding RNAs in Physiology and Disease[J]. Miao Sun, W. Lee Kraus. Endocrine Reviews. 2015(1).
[4] New insights into polar overdominance in callipyge sheep[J]. C.A. Bidwell, J.N. Waddell, T.M. Taxis, H. Yu, R.L. Tellam, M.K. Neary, N.E. Cockett. Anim Genet. 2014.
[5] 吴明明. Lnc-SEMT促进绵羊肌肉分化生成的功能研究[D]. 中国农业大学, 2016.