如何快速生产重组蛋白瞬时表达体系? ¹

当前全球范围内，越来越多的重组抗原和重组抗体被应用于医疗领域，特别是针对肿瘤、自身免疫病等难治病症以及体外诊断试剂。为了满足临床前研究对足够候选蛋白的快速生产需求，越来越多的高校和企业开始重视重组蛋白新药的开发，因此毫克到克级别的重组蛋白瞬时表达体系开始得到广泛应用。

细胞转染是一种将外源分子如DNA、RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具，广泛应用于研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验。

瞬时转染的特点

瞬时转染后，外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其他调控元件的分析。在细胞瞬时转染方法中，超螺旋质粒DNA转染效率较高，可在转染后24-72小时内进行分析，常常使用荧光蛋白、β半乳糖苷酶等报告系统来辅助检测。

瞬时转染的应用特性

目的：快速分析

筛选方法：抗生素抗性

表达持续时间：随细胞分裂而稀释至丢失48-72小时

目的DNA与宿主染色体：未整合

主要参考文献

[1] 孙静静，李桂林，周雷鸣，周伟伟，赵巧辉；哺乳动物细胞瞬时转染技术研究进展。《中国医药生物技术》 2019年03期