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化学发光法在新冠病毒抗体检测中的重要性? 1

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化学发光法在新冠病毒抗体检测中具有重要的临床价值,而AMPPD则是一种理想的化学发光物质,被广泛应用于新冠病毒抗体测定(化学发光法)试剂盒。

AMPPD是一种超灵敏的碱性磷酸酶底物,通用名为3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐。它在生物检测技术中有着广泛的应用。

AMPPD的分子结构包含一个-O-O-键很弱的四元杂环和一个磷酸根基团,磷酸根基团维持着整个分子结构的稳定。在常规情况下,这种化合物非常稳定,固态AMPPD在5℃下保存几乎不会分解。然而,当碱性磷酸酶催化作用发生时,AMPPD的磷酸根基团会发生水解,形成一个不稳定的中间体。这个中间体随后自行分解,释放出大量能量,激发化学发光反应并发射光子。AMPPD的分解半衰期为2~30分钟,发出持续性光,波长为470nm,在15分钟时达到高峰,15~60分钟内光强度保持相对稳定。

刘萍、黄爱龙等人将AMPPD作为化学发光底物液用于新型冠状病毒IgM/IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。通过碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶的催化作用,测定各样本管的发光值(RLU)。样本的发光值与其中的新型冠状病毒IgM/IgG抗体浓度呈正相关,从而可以检测人血清中的新型冠状病毒IgM/IgG抗体。

文莉惠则将AMPPD作为发光底物用于新型冠状病毒SARS-CoV-2 S蛋白检测方法的试剂盒中。酶结合物催化AMPPD发射光子,光子的数量与样本中S蛋白的浓度成正比。通过将SARS-CoV-2重组S蛋白梯度稀释作为检测系统校准品,并绘制浓度-相对发光值(RLU)的校准曲线,可以计算出样本中S蛋白的浓度。

目前,AMPPD的合成工艺相对复杂,公开的工业化生产方法并不多。

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