我想问下，我要做体外转录，能不能直接把T7启动子的序列设计在引物上进行目的基因的PCR，得到带有T7启动子序列的目的基因，进行体外转录？需不需要在启动子序列前设计保护碱基?

即使是进行线性模板的体外转录，一些调控元件也是必要的，如基因编码区上游除了需要带有最基本的启动子，还要有一段SD序列和纯粹的间隔序列，另外下游要有有效的终止子序列。
若通过PCR引物设计单纯地将启动子添加在目的基因上游进行线性模板的构建，能成功实现体外转录的几率很低。若通过PCR自己构建携带有多种调控元件的线性模板，在操作时间和难度上都会比较大。
这里有成熟的线性表达模板可以供您参考：原核http://www.tiangen.com/?productShow/t1/7/id/176.html ，真核http://www.tiangen.com/?productShow/t1/7/id/168.html