胸腺素Β10抗体的应用研究？ ¹

背景^[1-3]

胸腺素Β10抗体是一种多克隆抗体，可以特异性结合胸腺素Β10。它广泛应用于多种免疫学实验，如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。

检测原理：通过双抗体夹心法测定标本中胸腺素Β10的水平。首先，将纯化的胸腺素Β10抗体包被在微孔板上，形成固相抗体。然后，依次加入胸腺素Β10和HRP标记的胸腺素Β10抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，最终转化成黄色。颜色的深浅与样品中的胸腺素Β10浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），可以计算出样品中胸腺素Β10的浓度。

胸腺素β10（Tβ10）是胸腺素β家族的成员之一。与Tβ4类似，Tβ10也是与细胞运动有关的肌动蛋白隐蔽蛋白。研究发现，Tβ10可能与某些肿瘤行为相关，如细胞增殖、细胞凋亡、血管生成和肿瘤转移等。

目前，关于细胞中Tβ10作用的分子机制尚不明确。研究表明，Tβ10在胚胎发生和神经发育过程中有差异地表达，在炎症和肿瘤发生时也有上调的表达。Tβ10的表达改变与乳腺癌、食管癌、肝癌、胆管癌、卵巢癌等恶性肿瘤密切相关。然而，不同类型的癌症中，Tβ10的表达状态不同，具体作用机制尚未明确。

应用^[4][5]

GRα调控Tβ10致猪骨骼肌细胞氧化应激的研究

应激反应会导致机体内应激激素大量分泌，其中以皮质醇为主，它是影响肉质的一个重要因素。之前的研究表明，在动物的日粮中添加皮质醇会导致仔猪背最长肌肉组织受损严重，肌纤维间隙增大，凋亡细胞数增多。

然而，目前关于应激激素如何影响肉质以及导致肉质变化的机制还不完全清楚。最新的研究表明，糖皮质激素（glucocorticoid, GC）主要通过细胞膜与体内糖皮质激素受体α（glucocorticoid receptor alpha, GRα）结合，发挥一系列调控作用。

通过筛选GRα的靶基因，研究发现，干扰GRα后，Tβ10的表达显著下调，HSP90和HSP27的表达也下调。而超表达GRα后，Tβ10的表达显著升高，HSP90和HSP27的表达也上调。此外，网站预测还发现GRα与Tβ10存在结合位点。

因此，推测Tβ10可能是GRα的靶基因。通过双荧光素酶报告和染色质免疫共沉淀等实验初步验证，结果表明Tβ10可能是GRα潜在的靶基因。构建Tβ10超表达载体后，通过流式细胞仪检测发现，超表达Tβ10可以促进PSC细胞凋亡。此外，通过检测细胞的氧自由基含量发现，细胞处于氧化应激状态。通过qPCR实验检测发现，超表达Tβ10能促进PSC细胞中BAX、HSP90、HSP27和CAST的表达。

参考文献

[1] Zhu Z, Dong F, Liu X, et al. Effects of extraction methods on the yield, chemical structure and anti-tumor activity of polysaccharides from Cordyceps gunnii mycelia[J]. Carbohydrate Polymers, 2016.

[2] Li H, Shi R, Ding F, et al. Astragalus Polysaccharide Suppresses 6-Hydroxydopamine-Induced Neurotoxicity in Caenorhabditis elegans[J]. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2016.

[3] Ramamoorthy S, Cidlowski J A. Corticosteroids[J]. Rheumatic Disease Clinics of North America, 2016(1).

[4] Feng Z, Wang Z, Yang M, et al. Polysaccharopeptide exerts immunoregulatory effects via MyD88-dependent signaling pathway[J]. International Journal of Biological Macromolecule, 2015.

[5] Niu H D. GRα调控Tβ10致猪骨骼肌细胞氧化应激的研究[D]. 华中农业大学, 2018.