如何用光度法测定锌的含量? ¹

       锌是一种具有两性的二价金属，在化合物中呈现二价状态。锌在pH6.8的溶液中会沉淀析出Zn（OH）₂，但在过量碱溶液中也会溶解。另外，白色的硫化锌在pH1.2的溶液中会沉淀。目前，最常用的锌比色测定方法是使用二硫腙。该方法具有高灵敏度（λ＝538nm，摩尔吸收系数为9.26×10⁴）。其次，还可以使用2－羧基－2'－羟基－5'－磺基甲臜基苯（也称为锌试剂）：

在弱碱性溶液（pH～9）中，锌试剂与锌离子形成蓝色螯合物（λ＝625nm，摩尔消光系数2×10⁴），可以用来测定生物材料和水中的锌含量。另外，1－（2－吡啶基偶氮）－2－苯酚在pH6－10的溶液中与锌离子形成红色络合物（λ＝530nm，ε₅₂₀＝4.5×10⁴），可以用来测定铜、镍及其合金中的锌含量。最近，还提出了一种新的试剂，即5－（2－喹啉基偶氮）－2－单乙基胺－对－甲酚，它是目前最灵敏的测定锌的试剂（λ_最大＝530nm，ε＝9.6×10⁴）。

       锌试剂法是一种常用的测定锌含量的方法。在pH8.5－9.5的弱碱性溶液中，锌试剂与微量锌离子生成蓝色螯合物（当锌含量较高时会形成蓝色沉淀）。在这种溶液中，蓝色溶液在约620nm处有最大吸收，而锌试剂本身的最大吸收位于近500nm处。它们的吸收曲线如图Ⅷ－36所示。

       通过斜率法和等摩尔比法可以确定锌试剂与锌离子螯合物的螯合比为1：1。当将锌离子溶液加入试剂的碱性溶液中时，蓝色会直接形成。此外，该试剂还可以与Cu（Ⅱ）、Co（Ⅱ）、Ni（Ⅱ）等离子发生反应并显示出颜色反应。因此，在测定锌含量时，以下元素的离子存在会产生干扰：Al、Cr（Ⅲ）、Cu、Fe（Ⅲ）、Mn（Ⅱ）、Mo（Ⅵ）、Ni、Ti（Ⅳ）。当存在这些离子时，必须先将锌分离出来。

       使用本方法测定锌的灵敏度为0.03微克/厘米²，与二硫腙测定锌的方法的灵敏度（0.0016微克/厘米²）相近。在0.1－2.4ppm的锌浓度范围内，符合比尔定律，最适宜的浓度为0.5－2.0ppm（在620nm处）。

       实验所需的试剂和溶液如下：
1. 锌标准液：取纯金属锌1.0000克放入250毫升烧杯中，加入1：1盐酸10毫升，加热溶解后冷却，然后转移到1000毫升容量瓶中，用水稀释至刻度，充分摇匀。每毫升此溶液含锌1毫克。取上述溶液25毫升放入250毫升容量瓶中，用水稀释至刻度，充分摇匀。每毫升此溶液含锌100微克。 2. 缓冲液：pH＝9。 3. 锌试剂溶液：取0.130克试剂粉末溶于2毫升1M NaOH中，然后加水稀释至100毫升，溶液在一星期内保持稳定。

       测定步骤：取10毫升接近中性的分析试液（含锌量应在25至100微克范围内）放入50毫升容量瓶中，加入10毫升缓冲溶液和3.0毫升锌试剂溶液，用水稀释至刻度，充分摇匀后，与空白试剂溶液进行比较，在620nm处测定此溶液的吸光度。