WESTERN抗体洗脱液(强碱性)的应用及其在转基因大豆研究中的作用？ ¹

在蛋白质印迹法（免疫印迹试验）中，WESTERN抗体洗脱液(强碱性)是一种常用的再生液。它可以洗脱一抗二抗，使膜可以重复使用，方便检测其他蛋白质。该洗脱液含有氢氧化钠，适用于使用ECL类似的化学发光试剂进行的Western检测。使用WESTERN抗体洗脱液(强碱性)只需大约15-20分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。

除了在Western中的应用，WESTERN抗体洗脱液(强碱性)还可以用于定量PCR和Western blot结合检测转基因大豆植物组织和商业化大豆相关食品中CP4-EPSPS成分的研究。研究人员通过改良提取法，结合定量PCR和Western blot技术，可以检测转基因大豆不同组织和不同大豆商业化食品中CP4-EPSPS基因和蛋白的表达情况。

研究结果表明，改良的提取法可以同时从玉米、大豆、苜蓿和黄瓜组织中提取到RNA、DNA和蛋白质。所提取的RNA和DNA样品纯度较高，可以用于RT-PCR分析，而提取的蛋白质可以用于Western blot分析。相比于分别提取RNA、DNA和蛋白质的方法，这种一步法可以避免样品间的误差，并提高提取产物的纯度。

利用基因水平和蛋白水平两种方法检测不同大豆商业化食品中CP4-EPSPS基因和蛋白的表达后，研究人员发现在部分食物中至少有两条蛋白降解条带被检测到。在豆腐皮和豆干样品中，检测到了一条蛋白降解条带，而定量PCR未能在这些样品中检测到CP4-EPSPS基因。相反地，在标注含有大豆蛋白的火腿切片、肉丸和香肠样品中检测到了CP4-EPSPS基因的成分，但Western blot却未能检测到蛋白的降解。

参考文献

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