大家用infusion方法做载体有没有出现片段确实的情况?

最近做载体，用infusion的方法，总是两端连上了但是中间有一段序列缺失，诺维赞和塔克拉的酶都试过了，都是这样，我目的基因长度也不过1400bp，我另一个1700bp的都做成了  有什么解决方案吗大家