最近从细胞中提了几次蛋白,考马斯亮蓝法测蛋白浓度后发现蛋白浓度都很低,想要达到电泳时上样50μg蛋白的要求就不能达到上样量最大不能超过15μl(bio-rad电泳仪)的要求,怎么办呢?求帮忙!如何将蛋白浓度提高啊?我是在六孔板里裂解的细胞,待孔内细胞长满时每孔加了100μl裂解液,是因为细胞量太少吗?那么可不可以减少每孔加的裂解液的量?还是因为裂解得不够充分应当增加裂解液的用量啊?又或者是因为裂解液有问题吗?我们是自己配的RIPA裂解液:Tris-Hcl 50mM,pH7.4,NP-40 1%,脱氧胆酸钠0.5%,Nacl 150mM,EDTA 1mM,SDS 0.1%。是没有加亮氨酸转肽酶等导致蛋白被分解的缘故吗?