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液相条件的疑问?

样品不溶于水,溶于甲醇,因此极性应该不会太大,出峰时间会比较晚。1:首先该关注的是截止波长,甲醇截止波长205nm,最大吸收波长在200nm内,无需关注,甲醇做流动相一般检测波长在210nm以上;乙腈截止波长195nm,乙腈做流动相一般检测波长要求在200nm以上。2:根据目标物的情况来判定,只要峰形良好,甲醇作溶剂是不会对检测有影响的,甲醇会在2分钟左右有个溶剂峰。可进样空白甲醇扣除溶剂峰和空白峰。看这3个图分别是甲醇空白(203nm),样品(203nm处检测),样品(213nm处检测),请问那个最大的峰是溶剂峰是吗??为什么会这么大,我的样品峰呢???请问波长最大可以比样品最大吸收波长大多少啊????3、后来我把流速变成了0.4ml每分钟(上面的是1ml每分钟)这时候出峰时间在/5min左右,面积跟上面差不多,所以应该是同一个峰4、后来我把流速变成了0.2ml每分钟,这时候出峰时间在14min左右,但峰面积比上述3图的面积大很多很多,我猜测应该是样品峰,但刚才那个峰呢??所以:流速变化(变小)会影响(延迟)出峰时间吗???请谁懂得分析分析。。在线等。。回答好的可以追加分数啊20151130_112156.jpg20151130_112811.jpg20151130_113940.jpg
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共4个回答
还是以甲醇为空白走一下紫外看看吧
HPLC最佳流速是1ml/min,不用降低。想看看分离有没有改善最好降低有机相比例。
1. 你看看待测物的Uv吸收图,不一定只用紫光度最大的封顶波长值检测,可以用其它小峰处的波长检测。检测波长一般应该大于210nm。第一个图是溶剂峰,后续检测把样品峰掩盖住了。如果你配备的是DAD检测器,3D模式开启的话,应该可以看到各个波长下的色谱图,由此也可以确定最佳检测波长。2. 一般来说,流速低,出峰慢。一味降低流速没什么意义。,
1. 你看看待测物的Uv吸收图,不一定只用紫光度最大的封顶波长值检测,可以用其它小峰处的波长检测。检测波长一般应该大于210nm。第一个图是溶剂峰,后续检测把样品峰掩盖住了。如果你配备的是DAD检测器,3D模式开启的话,应该可以看到各个波长下的色谱图,由此也可以确定最佳检测波长。2. 一般来说,流速低,出峰慢。一味降低流速没什么意义。
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