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为什么D-Hanks缓冲液在生物学实验中被广泛使用? 1

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缓冲液是一种含有弱酸及其盐的溶液,用于提供酶反应的适宜环境。不同酶反应需要不同种类和浓度的缓冲离子以及pH值,因此每种酶反应都有最适合的缓冲液。Hank's液是生物学实验中最常用的平衡盐溶液,主要用于细胞培养取材时的漂洗和配制其他试剂。

D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含钙和镁离子,因此可以用于配制胰蛋白酶消化液。D-Hanks缓冲液不含酚红,不含钙镁,pH值为7.2-7.4,适宜保存在15-30℃。

D-Hanks缓冲液(不含酚红)的使用步骤如下:(一)准确称量试剂,选择适宜的培养基,确保试剂纯净。(二)校正pH值,将培养基成分放入容器内,加热溶解,补充水分,使用精密试纸或酸度计测定pH值,用1NNaOH和1NHCl调节pH值。(三)过滤,将培养基倒入玻璃漏斗中,使用D-Hanks缓冲液纱布夹棉花或滤纸过滤至透明。(四)分装,将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内,准备灭菌。(五)灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。

高压蒸汽灭菌法比干热灭菌法效果更好,因为菌体在湿热情况下吸收水分后易于凝固变性,而蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。使用D-Hanks缓冲液(不含酚红)时需要注意以下事项:1.使用前检查培养基是否被污染或超过有效期。2.尽快接种培养采集的标本,以确保结果准确。3.培养基仅用于外部诊断。4.培养后需要进行灭菌处理。

主要参考资料

[1] 协和医学词典

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