如何从人体全血中提取病毒基因组DNA? ¹

病毒是一类微小的非细胞型微生物，它们寄生在活细胞内并以复制方式增殖。病毒可以感染人体细胞，通过细胞内的复制过程引起疾病。目前已知的DNA病毒有乙肝病毒、T2噬菌体、天花病毒、花椰菜花叶病毒等。在这些病毒中，乙肝病毒对人类的影响和危害最大，传染性最强。因此，提取乙肝病毒基因组DNA的方法尤为重要。

目前，乙肝病毒DNA检测已经成为临床乙肝病毒诊断的主要方法之一。要进行病毒DNA检查，首先需要从人体血液中提取病毒基因组DNA。传统的提取方法需要对血液进行血浆和血清分离，这样会增加操作步骤、工作量，并且容易造成二次污染和病毒DNA的损失。因此，研发一种直接从人体全血中提取病毒DNA的试剂盒和方法具有重要意义。

适用范围

病毒DNA提取试剂盒适用于从血清、细胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因组，不适用于RNA病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

组分

（1）病毒DNA提取试剂盒中的WashingBuffer中已经加乙醇，无需单独添加。

（2）VirusDNA/RNALB1，储存时可能会有白色结晶沉淀，放置于56℃水浴锅溶解后，不影响使用效果。

（3）蛋白酶K（20mg/ml）长期保存请储存于-20℃，短期室温保存（6个月），其它组分储存于室温。

特征

病毒DNA提取试剂盒能够在短时间内获得高质量的病毒DNA和RNA。操作简单，无需有机抽提或乙醇沉淀。重复性强，产量高。同时，该试剂盒能够完全去除污染物和抑制剂，方便下游应用。

案例

应用病毒RNA提取试剂盒从含有丙型肝炎病毒（HCV）的血清样品中纯化得到病毒RNA，并进行逆转录后的qPCR实验。实验结果显示，该方法可以检测并稳定扩增含有103copies/ml的HCV病毒。

主要参考资料

[1] 协和医学词典

[2] 病毒RNA提取试剂盒操作说明