人角化细胞生长因子(KGF)ELISA KIT是一种用于定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人角化细胞生长因子（KGF）含量的试剂盒。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理。通过将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被人角化细胞生长因子（KGF）捕获抗体的包被微孔中，经过温育和洗涤后，使用底物TMB显色并测定吸光度（OD值），从而计算样品浓度。
1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后离心，取上清即可检测，或将标本冷冻保存，但应避免反复冻融。
2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内离心，或将标本冷冻保存，但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其他生物标本：离心后取上清即可检测，或将标本冷冻保存，但应避免反复冻融。
注：溶血标本不适合进行此项检测，因为溶血会影响最后的检测结果。
1.从室温平衡20分钟后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封保存。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔中加入不同浓度的标准品，样本孔中加入待测样本，空白孔不加。
3.标准品孔和样本孔中加入HRP标记的检测抗体，封住反应孔，温育60分钟。
4.洗板5次，每次加入洗涤液并甩去洗涤液。
5.加入底物A、B并孵育15分钟。
6.加入终止液并测定各孔的OD值。
该研究从人胚肺成纤维细胞中克隆人角化细胞生长因子-1(KGF-1)编码区序列，并构建了真核荧光表达载体。通过提取总RNA并进行反转录PCR，获取KGF-1cDNA编码区序列，将其与质粒载体连接，构建了重组表达载体。通过免疫荧光法检测骨髓基质细胞中KGF-1蛋白的表达，结果表明成功构建了重组质粒，并初步探讨了该基因在骨髓基质细胞中的表达。
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