试剂盒的主要成分包括酶标板、试剂和标准品等。
试剂盒的性状为盒装液体。
试剂盒需要在2-8℃保存。
可以使用血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等作为标本。
ELISA常用的方法包括双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
预期可以使用ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其他相关生物液体中的含量。
ELISA是一种敏感性很高的试验技术，它以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合。
1. 使用前，将所有试剂充分混匀，避免产生大量泡沫。
2. 根据待测样品数量和标准品的数量确定所需的板条数，建议每个标准品和空白孔做复孔。
3. 加入稀释好的标准品和待测样品到反应孔中，然后立即加入生物素标记的抗体，盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，然后甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次，如果使用洗板机洗涤，则洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，然后甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次，如果使用洗板机洗涤，则洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟，避免光照。
8. 取出酶标板，迅速加入终止液，加入终止液后立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
[1] 陈家琪 瞿爱东 祝婧烨 黄海武。阻断型抗人IgE单克隆抗体的制备及其表位分析。《中华微生物学和免疫学杂志》
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