HRP山羊抗小鼠IGG1是一种多克隆抗体,能够特异性结合小鼠IGG1,并广泛应用于多种免疫学实验,如Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等。
该抗体的检测原理是通过双抗体夹心法来测定样本中小鼠IGG1的水平。首先,在微孔板上包被纯化的小鼠IGG1抗体,形成固相抗体。然后,依次加入样本中的小鼠IGG1和HRP标记的小鼠IGG1抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后,加入底物TMB进行显色反应。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,然后在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与样品中的小鼠IGG1浓度呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中小鼠IGG1的浓度。
IgG亚类是指lgG1-lgG3与抗原形成免疫复合物,通过经典途径活化补体,发挥溶菌、溶细胞等作用。
人免疫球蛋白G有4个亚类,分别是免疫球蛋白G 1、免疫球蛋白G 2、免疫球蛋白G 3和免疫球蛋白G 4。而小鼠的免疫球蛋白G有4个亚类,分别是免疫球蛋白G 1、免疫球蛋白G 2a、免疫球蛋白G 2b和免疫球蛋白G 3。其中,免疫球蛋白G 3的γ3铰链区含有62个氨基酸残基,具有4个重复的γ1铰链区(15个氨基酸残基)的串连结构,重链间二硫键数量多,约10~15个,因此易被蛋白酶裂解,半衰期也较短。
该研究旨在通过建立小鼠致敏模型,观察TLR2基因敲除小鼠肺组织STAT3表达及炎症指标的改变,以探讨TLR2-STAT3通路在过敏性炎症发病机制中的作用。
实验中,将小鼠分为四组,分别进行致敏模型和对照模型的建立。通过HE染色观察肺组织细支气管周围炎症细胞浸润情况,并通过肺泡灌洗液细胞分类计数观察各类炎症细胞的变化。同时,采用ELISA检测外周血中的免疫球蛋白水平,以及采用Real-Time PCR检测肺组织中的IL-4、IL-5和IL-13 mRNA表达水平。此外,还通过免疫组化和免疫荧光方法检测肺组织中STAT3和NF-κB的蛋白表达水平。最后,观察CPT对致敏小鼠STAT3、NF-κB和IgG1表达以及肺组织炎症细胞浸润的影响。
实验结果显示,成功建立了小鼠致敏模型。致敏后,气道周围炎症细胞浸润明显增加,肺泡灌洗液中巨噬细胞比例下降,嗜酸性粒细胞比例上升。同时,肺组织中IL-4和IL-13 mRNA表达明显上调,血清中的免疫球蛋白水平也明显增加。以上差异均具有统计学意义。
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