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WB时,上方时常出现...
生物医学工程
WB时,上方时常出现非特异性条带?
问题描述:WB相关问题!!!
最近一直在做WB,但是出现一个不正常的情况,前面验证抗体的时候,抗体是比较好的,但是后面正式开始实验的时候,在目的条带的上方总是出现一个非特异性条带,并且颜色很深,后面重复几次之后,发现同一批蛋白样品有时出现这样的情况,有时会恢复正常,且同一批做的其他的抗体也会同时出现这种现象(正常的时候都正常,不出现上线的带,不正常的时候都不正常,所有抗体上面都出现一条带。
请大家帮帮忙,困扰了很久的问题,谢谢!
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共1个回答
难.,技术员(储备干部)
2022-01-26回答
你正常情况下,也是三条带,只是最上面那个带弱,说明抗体是能敷出这个带,是多克隆抗体吧?你说的非正常条带是最上面那个杂带很亮,是蛋白裂解问题,还是蛋白降解问题?下次注意细胞裂解和降解问题,同时可以试试把这个杂带跑分开,剪掉。
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