考马斯亮蓝是一种呈粉末状的蓝色物质,常装在小瓶子中。通过与酒精、磷酸和蒸馏水的配制,它可以变成绿色溶液,类似于靛青墨水。然而,当与蛋白质接触时,它会产生奇妙的颜色反应,变成鲜艳的亮蓝。考马斯亮蓝的名字实际上来自于它工作时的颜色。
考马斯亮蓝的分子中含有几个疏水环,这些环可以通过分子间作用力与蛋白质结合,形成紧密而稳定的结构。蛋白质的浓度越高,颜色就越深。通过一种仪器,可以将颜色深浅转化为数值,从而测定各种溶液中蛋白质的浓度。无论是鸡蛋清、牛奶、豆芽汤、血浆还是细胞质,只要含有蛋白质,都可以使用考马斯亮蓝进行染色。这种试剂在生物学中被广泛应用,是我学习生物的第一课。
考马斯亮蓝除了染色蛋白质外,还有其他许多用途。
首先,它可以用于观察细胞骨架。细胞骨架是真核细胞中一种坚韧的丝状蛋白质,通常在光学显微镜下无法看到。通过取得洋葱鳞片叶内表皮细胞,并用有机溶剂处理,可以使细胞膜裂解,留下细胞壁和细胞骨架。使用考马斯亮蓝染色后,可以观察到细胞骨架的存在,虽然不够清晰,但仍然可以欣赏到蓝色云雾般的结构。
其次,考马斯亮蓝可以在分子生物学实验中使用。当我们获得经电泳处理过的无色凝胶片时,可以用考马斯亮蓝进行显色,使蛋白质条带变蓝。这类似于冲洗照片的过程。在一次实验中,我使用小试管接收滤液,并加入少量的考马斯亮蓝。通过观察试管的颜色变化,可以判断何时蛋白质已经完全滤出,停止加水。然而,令人惊讶的是,即使接满了三十多个小试管,试管中的考马斯亮蓝仍然保持亮蓝色,没有变浅。我继续加水冲洗层析介质,直到洗涤液中的蛋白质浑浊色消失,而试管中的考马斯亮蓝仍然保持亮蓝色。这让我感到异常,于是我将使用的考马斯亮蓝滴入蒸馏水中,惊奇地发现它变蓝了。这说明水中可能存在蛋白质污染,但我们并不知道这些污染物是从哪里进入的,可能是一些粉尘、呼出气体或细菌。幸好,我们没有将其用于刑事侦查中的血迹探案,否则后果不堪设想。
据说,考马斯亮蓝可以检测到的蛋白质最低浓度为2.5毫克每升。这让我想象在刑事侦查中使用它寻找血迹一定会很有效,因为这个浓度相当于一箱水中只有一滴血。
还有一次我在进行层析实验时,使用小试管接收滤液,并加入少量的考马斯亮蓝。意外的是,无论加入多少水,试管中的考马斯亮蓝都保持亮蓝色,甚至没有变浅。这让我突发奇想,将所用的考马斯亮蓝滴入蒸馏水中。惊奇地发现,蒸馏水中的考马斯亮蓝也变蓝了。至于水中的蛋白质污染是从哪里进入的,我们并不得而知,可能是一些粉尘、呼出气体或细菌。幸好,我们没有将其用于刑事侦查中的血迹探案,否则全世界将充满鲜血。
来源:考马斯亮蓝