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改造载体构建?
生物医学工程
改造载体构建?
科研小白,进实验室两个月,导师让我改造一个载体,将一个载体上的基因插入另一个载体上。自己查资料,学姐指导,从找酶切位点,设计引物,酶切回收,连接载体和片段,转化,菌落PCR/F8验证一步一步,最后到用原来的酶再酶切验证的时候,却只切出一条带,两条带的位置也不正确,学姐说是假阳性,我从连接开始重做,反复做了好几遍,改变载体和片段连接的比例,时间,最后酶切验证的结果都是一样的,真的很失落,过年也没回家,就在实验室构建这个载体,结果却不如人意,求各位大神指点,帮帮我吧。
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犹存,仪表管理
2019-02-22回答
用同源重组法试试
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