异源表达蛋白降解严重？

大肠杆菌表达多结构域大蛋白，降解严重，尝试了加蛋白酶抑制剂也帮助不大，请问大家有什么这方面的经验吗

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诱导表达

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蛋白太大，可能大肠杆菌水解酶水解导致，
（1）换宿主菌，不同宿主菌可能水解酶表达不一样
（2）用低泄漏表达宿主菌，如PlysS，缩短表达时间
（3）改变表达区域，如细胞间质，或者分泌到胞外
（4）换表达系统，如昆虫或其他真核细胞
（5）分析可能水解切除位点，突变后表达
（6）--

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可以从质粒和宿主两方面入手，改质粒：p'ET
pETcoco质粒，pBAD质粒，表达更严谨。或者尝试pCold稳定一下mRNA，低温诱导表达。

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可以从质粒和宿主两方面入手，改质粒：p'ET

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