WI-38细胞是一株来自女性高加索人的正常胚肺组织的人2倍体细胞系。它具有2Rh的培养时间和有限的寿命（Sd代）。WI-38细胞是一种成纤维细胞，能够产生胶原。作为首个用于人类疫苗制备的人二倍体细胞系，添加TNF-α可以促进WI-38细胞的生长。
培养步骤如下：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：当细胞密度达到80%-90%时，可以进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代步骤如下：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
研究者以D-半乳糖诱导WI-38（PDL30-40）细胞衰老，建立了D-半乳糖诱导细胞衰老模型，并在此基础上探讨了诱导衰老的分子机制和潜在的抗衰老靶点。
研究方法包括使用MTT法测定不同浓度D-半乳糖对WI-38细胞活力的影响，使用SA-β-Gal染色检测不同浓度D-半乳糖连续处理WI-38细胞14天后的衰老状况，使用Western Blot法检测细胞周期抑制蛋白P21和P16以及衰老标志蛋白β-gal的表达，使用DCFH-DA法测定不同浓度D-半乳糖对WI-38细胞总ROS水平的影响，以及使用Western Blot检测抗氧化酶、自噬标记蛋白和自噬相关通路蛋白的表达。
在D-半乳糖诱导细胞衰老模型上，研究者使用不同浓度的Mito Q进行干预，进一步测定细胞总ROS水平，使用SA-β-Gal染色检测衰老状况，使用Western Blot进一步检测衰老相关蛋白、抗氧化蛋白以及自噬标记蛋白的表达，使用MDC法检测自噬。
研究结果表明：
1、D-半乳糖对WI-38细胞活力具有一定的抑制作用，并且随着浓度的增高而下降。
2、D-半乳糖可诱导WI-38细胞衰老；不同浓度D-半乳糖处理14天后，SA-β-Gal染色细胞阳性率随着浓度的增加而增高，在5g/L浓度时达到最高。
3、不同浓度D-半乳糖处理14天后，P21、P16和β-gal的表达随着D-半乳糖浓度的增加而逐渐增高，P16和β-gal的表达在5g/L浓度达到最高。
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