人乳腺管癌细胞是一种乳头状侵入性导管瘤，已有转移的局部淋巴结中有3个。BT-549细胞是从这种组织中分离出来的，具有多态性，包括上皮细胞样组分和多核巨细胞。
细胞处理步骤：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：当细胞密度达到80%-90%时，可以进行传代培养。
传代方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
通过模拟肿瘤微环境中的人乳腺成纤维细胞与人乳腺癌细胞的共培养，研究IL-13对人乳腺成纤维细胞增殖和自噬基因表达的影响。
方法：
1.细胞培养：使用含有10%胎牛血清、105U/L青霉素和105U/L链霉素的DMEM培养液，放入37℃、5%CO2、100%相对湿度的培养箱中培养。
2.实验分组：分为空白组、IL-13组、共培养组和共刺激组。
3.台盼蓝染色：用台盼蓝染色检测Hs578Bst细胞的活性。
4.CCK-8法：将Hs578Bst细胞接入6孔板，加入IL-13或与MDA-MB-435细胞共培养，培养72小时后，使用CCK-8法测定细胞的增殖。
5.免疫细胞化学法：培养72小时后，使用免疫细胞化学方法检测Hs578Bst细胞自噬分子Beclin1和LC3II的蛋白表达。
6.实时定量荧光PCR：培养72小时后，使用实时定量荧光PCR检测Hs578Bst细胞自噬分子Beclin1和LC3II的mRNA表达。
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