人小肠粘膜上皮细胞的培养基及其应用？ ¹

背景^[1-3]

人小肠粘膜上皮细胞完全培养基是一种专门用于体外培养人小肠黏膜上皮细胞的培养基。它包含了人小肠粘膜上皮细胞生长所需的各种成分，无需添加任何其他成分，可以直接用于人小肠粘膜上皮细胞的体外培养。

人小肠粘膜上皮细胞是覆盖于身体表面并衬贴于体内空腔器官腔面的细胞。它们具有明显的极性，一面朝向身体表面或腔面，称为游离面；另一面朝向深部的结缔组织，称为基底面。上皮细胞具有强大的角质化和更新能力，并且在保护、吸收、分泌和排泄等方面发挥重要作用。小肠粘膜是由粘膜上皮、固有膜和粘膜肌层三层组成，是小肠壁的最内层结构。

应用^[4][5]

肠上皮细胞谷氨酰胺载体B～0AT1/ASCT2的克隆表达及严重创伤后的功能调控研究

该研究的目的是构建可表达人类中性氨基酸载体B0AT1基因的真核表达载体，并建立稳定转染Hela细胞系，以研究肠上皮细胞谷氨酰胺载体B0AT1的功能调控机制。

方法：首先从人正常小肠上皮细胞中提取总RNA，利用RT-PCR方法扩增出B0AT1基因片段，然后将其插入真核表达载体pcDNA3.1中，构建重组表达质粒pcDNA3.1-B0AT1。接下来，将阳性克隆脂质体法转染Hela细胞，并经过G418筛选获得稳定表达B0AT1的细胞株。最后，利用RT-PCR法检测B0AT1基因的mRNA表达，并进行氨基酸摄取实验证实转染pcDNA3.1-B0AT1的Hela细胞具有B0AT1基因的生物学活性。

结果：成功克隆到人B0AT1基因，并构建了真核表达载体pcDNA3.1-B0AT1。转染pcDNA3.1-B0AT1的Hela细胞稳定表达人B0AT1基因，并筛选出稳定表达B0AT1的细胞系。

结论：该研究成功克隆了人中性氨基酸载体B0AT1，并在Hela细胞中获得了稳定的表达。这为进一步研究B0AT1的功能及其调控干预提供了良好的基础。

参考文献

[1] Phorbol Esters Rapidly Attenuate Glutamine Uptake and Growth in Human Colon Carcinoma Cells. Timothy M.Pawlik M.D.,MPH,Wiley W.Souba M.D.,Sc.D.,Thomas J.Sweeney M.D.and Barrie P.Bode Ph.D.Journal of Surgical Research.2000

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[3] Enterocyte nutrient transport is preserved in a rabbit model of acute intestinal ischemia. Iannoli P, Miller JH, Ryan CK, and Sax HC. Journal of Parenteral and Enteral Nutrition.1998

[4] The type of sodium-coupled solute modulates small bowel mucosal injury, transport function, and ATP after ischemia/reperfusion injury in rats. Kozar R.A, Schultz S.G, Hassoun H.T, et al. Gastroenterology.2002

[5] 黄骞.肠上皮细胞谷氨酰胺载体B～0AT1/ASCT2的克隆表达及严重创伤后的功能调控研究[D].第二军医大学,2007.