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蛋白电泳部分样品没有条带?

用RIPA提取几种豆粕样品的蛋白(0.1mg样品/1mL RIPA),5×loading buffer混匀,煮沸10min,离心取10ul上清上样。
先90V跑到一条直线,再130V到溴酚蓝抛出去。
银染。
同样的方法有两个样品提不出来,marker和其他样品都有条带。
第一条是marker,二~六都是样品,第二、第三个样品都没有明显的条带。
因为在等二、三个样品显色,所以染色太久了,效果不太好……
尝试过使用TCA/丙酮法提取,用考马斯亮蓝染色,效果不好,所以改用了RIPA裂解液提取,用银染染色。


QQ图片20191230225752.png
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共3个回答
好淡的带

准备做大豆抗原蛋白吗
打算做去除抗原蛋白的实验,所以想提取总蛋白,看看效果如何。不过有些样品提取不出来
好淡的带
我有用BCA法测过loading前的蛋白浓度,都在5-8mg/mL左右,但是条带还是很浅
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