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GAPDH可以扩增出来，目标基因却扩增不出来，为什么?

有人做过HUVECs中Nox-4mRNA的表达测定吗？我连着换了三对引物都没有扩增出来，可是GAPDH却可以很好的扩增出来。。我想请问可能是什么问题？三次中第一次有部分样品扩增出来了，可是CT值很大，大约35左右，但是大部分样品还是没有扩增出来。后面两对引物都没有扩增出来。

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共1个回答

GAPDH出来只说明你的实验体系基本ok，1. 优化引物。找个靠谱的公司，一般公司都自带免费设计的，或者用已有文献的引物。2. 优化qPCR体系，要以你的目标基因的体系为准，内参基本都能出来。3. 如果1-2都优化后仍然无信号，可能提示你的目标及基因的丰度太低～

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