1. 72-1型分光光度计的构造特点
相较于72型分光光度计,72-1型分光光度计进行了重大改进。它采用了体积较小的晶体管稳压电源,取代了笨重的磁饱和稳压器。同时,它还使用真空光电管作为光电转换元件,配合放大线路将微弱光电流放大后推动指针式微安表。这样就取代了体积较大且容易损坏的灵敏光点检流计。由于电子系统的改进,所有部件可以组装成一个整体,仪器体积减小,稳定性和灵敏性都得到了提高,外形也更加美观大方。
图13-13展示了国产72-1型分光光度计的外观照片。
2. 72-1型分光光度计的操作方法
(1) 在接通电源之前,确保电表指针位于"0"刻线上。如果不是这种情况,可以使用电表上的校正螺丝进行调节。
(2) 打开仪器的电源开关(接通220V交流电),打开比色槽暗箱盖,使电表指针处于"0"位。预热20分钟后,选择所需的单色光波长和相应的放大灵敏度档,使用调节电位器校正电表的"0"位。
(3) 关闭比色槽暗箱,将比色槽座调整到蒸馏水校正位置,使光电管接收到光线。通过旋转光量调节器,调节光电管输出的光电信号,使电表指针正确显示100%。
(4) 根据上述方法连续几次调整"0"位和电表指针100%,仪器即可进行测定工作。
(5) 根据不同的单色光波长和光能量的不同,选择放大器灵敏度档位。各档的灵敏度范围如下:
第一档:×1倍
第二档:×10倍
第三档:×20倍
选择灵敏度档位的原则是能够使空白档在光量调节器调整到100%的情况下良好使用。
(6) 空白档可以使用空气空白、蒸馏水空白或其他有色溶液或中性吸光玻璃作为参照物。将空白调整到100%,可以提高吸光读数以适应溶液的高浓度测定。
(7) 根据被测物质在溶液中的含量不同,可以选择不同规格光程长度的比色槽。目标是使电表读数在0.8消光范围内。
75-1型可见紫外分光光度计
1. 75-1型分光光度计的工作原理
之前介绍的581-G型光电比色计和72型分光光度计的工作波段都在400~800nm范围内,只能测定物质在可见光区的吸收光谱。而国产75-1型分光光度计的工作波段在200~1000nm范围内,可以测定物质在紫外区、可见光区和近红外区的吸收光谱,因此应用范围更广泛。图13-14展示了国产75-1型分光光度计的外观照片。
下面介绍紫外吸收光谱在分析工作中的应用:
根据物理知识,光波的波长越短,能量越大。紫外光的波长范围为200~400nm,可见光的波长范围为400~800nm。因此,紫外光的能量比可见光的能量大。可见光只能激发物质分子中处于不稳定能级的价电子,而紫外光可以激发比较稳定的不饱和键的π电子,尤其是共轭体系中的电子。因此,共轭的不饱和碳氢化合物和具有孤对电子的化合物(包括无机化合物)在紫外区都有吸收光谱。相反,饱和的碳氢化合物在紫外区不会产生吸收峰,因此通常使用饱和的碳氢化合物作为紫外吸收光谱分析的溶剂(如己烷、庚烷、环己烷等)。
紫外吸收光谱主要应用于鉴定含有双键,尤其是共轭体系的化合物,如含羰基、醛基、羧基、硝基等的脂肪族化合物,以及含苯环的芳香族化合物。