骨髓间充质干细胞冻存液的特点和冻存步骤是什么? ¹

骨髓间充质干细胞血清型程序冻存液是一种特殊配方，用于冻存骨髓间充质干细胞。它能够降低冻存过程中冰晶对细胞的损伤，提高细胞复苏率和活力。该产品经过了细菌、真菌和支原体检测，质量得到保证。冻存液应保存于2-8°C，有效期为三年。为了保持产品的稳定性，请避免反复冻融。

特点

骨髓间充质干细胞冻存液具有以下特点：

• 即用型产品，使用方便快捷。
• 复苏率高达90%，远超普通冻存液的70%。
• 无需程序冻存，细胞可直接置于-80°C冰箱完成冻存过程，省时省事。
• 无血清无蛋白配方，成分明确，不影响细胞的生长和分化潜能及其他高级应用。

冻存步骤

以下是骨髓间充质干细胞冻存的步骤：

1. 选择处于对数生长期的细胞，按照常用的方法收集细胞于离心管中，根据细胞密度和冻存管尺寸计算所需冻存细胞数。
2. 将细胞悬浮液置于离心管中，进行离心收集。
3. 吸去上清液。
4. 加入适量的冻存液，混合均匀，制成细胞混合液。
5. 将细胞混合液分装于已标示完整的冷冻保存管中。
6. 将冻存管置于-80°C冰箱中，24小时后移入液氮进行长期保存。

复苏：

1. 从液氮中取出冻存的细胞，放入37°C水浴锅中快速解冻。
2. 待细胞混合液完全融化后，逐滴加入少量细胞完全培养基，混合均匀。
3. 离心收集培养细胞，吸去上清液。
4. 加入适量的完全培养基重悬细胞。
5. 按照合适的接种密度将细胞接种到培养容器中，加入预热的新鲜细胞完全培养基。
6. 轻轻摇晃培养器皿，使细胞分布均匀。
7. 放置于37°C、5% CO2、饱和湿度的培养箱中继续培养。

主要参考文献

[1] 佟明华；雷香丽；王亚萍；孔祥平；罗显荣。大鼠骨髓间充质干细胞的纯化、冻存及成瘤性分析。中国组织工程研究。