如何进行小鼠肺癌细胞LLC的原代培养? ¹

小鼠肺癌细胞LLC是一种稳定的原代细胞系，常用于研究生物体细胞的生长、代谢和繁殖。本文介绍了LLC细胞的来源以及原代培养的方法。

原代培养是从生物体中获取组织或器官的一部分进行培养的方法，可以更接近于生物体内的生活状态。原代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。常用的原代培养方法有组织块培养和分散细胞培养。

组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上，加入培养基后进行培养。分散细胞培养则是将组织块用机械法或化学法使细胞分散。对于LLC细胞的原代培养，可以使用蛋白水解酶或金属离子螯合剂来消化细胞间的结合物，然后经过机械轻度振荡，使其成为单细胞。

LLC细胞的应用

建立稳定表达IL-12的LLC细胞系及IL-12活性检测

白介素-12（IL-12）是一种具有抗瘤活性的细胞因子。通过构建能在真核细胞内稳定表达小鼠IL-12的质粒，可以建立稳定表达IL-12的LLC细胞系，从而为研究IL-12的免疫调节机制和抗瘤免疫反应提供基础。

具体方法是通过聚合酶链反应（PCR）扩增IL-12的片段，将其连接到真核表达载体上，然后转染到LLC细胞中。通过流式细胞仪观察细胞周期和凋亡，并使用G418筛选获得阳性克隆。最后，通过RT-PCR和ELISA检测IL-12的表达和活性。

结果表明成功构建了稳定表达IL-12的LLC细胞系，并且该细胞系具有IL-12的生物学活性。

参考文献

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